三种小麦染色体结构的特征Thinopyrum媒介多倍体显示异源染色体和小麦染色体经常重排

背景

Thinopyrum媒介（2n = 6x = 42）是一个重要的野生多年生Triticeae物种表现出许多潜在有利的小麦改善性状。小麦-TH.．媒介部分两倍双倍倍数用作转移所需基因的桥梁TH.．媒介在普通小麦。

结果

三个八倍体Trititrigia从杂交后代中筛选出对条锈病、白粉病和蚜虫具有良好抗性的材料TE261-1、TE266-1和TE346-1TH.．媒介和普通小麦品种'yannong 15'（YN15）。原位杂交（GISH），荧光原位杂交（鱼）和多色GIRH（MCGISH）分析证明了三个八倍体Trititrigia拥有42个小麦染色体和14次Th。媒介染色体。14号外星人(Th。媒介）染色体属于由J-，J组成的混合基因组^S.-和st -基因组染色体而不是单个J, J^S.或st基因组。在1A，6A，6B，2D和7D染色体中也通过鱼，MCGISH和分子标记分析检测不同类型的染色体结构变化。外星染色体的身份和三个小麦染色体中的变异Trititrigia八滴体也不同。

结论

在小麦 -Th。媒介部分两倍吡咯具有14种外来染色体，属于由J-，J的混合基因组成^S.-和St-染色体，以及42条具有不同结构变异的小麦染色体。这些材料可作为小麦抗病基因转移的遗传资源Th。媒介常见的小麦。

Thinopyrum媒介(主持人)巴克沃斯和D.R.杜威[syn.]Agropyron媒介(主机)Beauvor和Elytrigia媒介物（主机）Nevski]（2n = 6x = 42;基因组公式E.^E.E.^E.E.^B.E.^B.STST，JJJ.^S.j^S.STST，EEVVStSt或j^R.j^R.j^vs.j^vs.STST）被认为是一部分的自身化opxaploid，其基因组宪法涉及疑问是一个研究热门主题Triticeae作物的研究。的存在S.基因组(后来改为英石由Wang等人。[1]） 在Th。媒介首先由刘某和王某报道[2]并由张等人确认。[3.，这就引出了基因组公式jjjjstst或EEEEStSt， 在哪里j基因组是来自Th。Bessarabicum(2 n = 14JJ.或E.^B.E.^B.)，英石基因组是来自Pseudoroegneria strigosa(2 n = 14STST） 和E.基因组是来自TH.．elongatum(2 n = 14EE.或E.^E.E.^E.)．同样，利用基因组原位杂交技术，Chen等认为基因组构成TH.．媒介是JJJ.^S.j^S.STST在哪里j^S.可能是一个修改的j或E.[4.］.吉等人。得出结论，基因组构成TH.．媒介是E.^E.E.^E.E.^B.E.^B.STST通过使用多色GISH（McGISH）5.］.分析了叶绿体TRNL-F序列，颗粒结合的淀粉合酶I（GBSSI）和Gish，Mahelka等。（2011）推断出基因组TH.．媒介有关Ps．stigosa.（STST)，杜鹃花绒毛索姆(2 n = 14VV.）和复杂的起源TH.．elongatum（EE.） 和节节麦(2 n = 14DD.) [6.］.j^R.j^R.j^vs.j^vs.STST由Wang等人提出，谁利用EST-SSR标记分析了基因组演变TH.．媒介,j^R.和j^vs.请参阅祖先基因组j^E.（E.）和J^B.（j),分别7.］.

TH.．媒介被认为是最重要的多年生小麦科种之一，具有许多潜在的有利于小麦改良的性状[8.那9.那10那11］.由于其可与普通小麦的可巧力，转移和利用Th。媒介抗病基因，包括叶锈病抗性基因Lr38 [12];茎锈蚀基因SR44 [13];抗条锈病基因Yr50 [14];和大麦黄矮状抗性基因BDV2 [15], Bdv3 [16]和bdv4 [17那18]，已经完成了。

Trititrigia从杂交后代之间开发了八倍增曲面TH.．媒介并从普通小麦中继承了许多优良性状TH.．媒介，如抗白粉病，叶子锈，茎生锈和条纹锈病[19那20.］.此外，更容易成功交叉普通小麦Trititrigiaoctoploids比TH.．媒介．因此，Trititrigia八滴虫是有价值的种质，可与常见小麦杂交，不断生产小麦 - 外来添加，取代和转移线，可以将来自外星物种的有益特征转移到小麦中[9.那21那22］.

许多Trititrigia在过去的五十年中已经生产了八倍体，并用作中间父母，以促进来自的优异基因的转移TH.．媒介小麦。这些Trititrigia八滴体包括TAF46 [23), 7882924]，在“忠”系列Trititrigiaoctoploids [25]和TE系列Trititrigiaoctoploids [20.那21那26那27那28］.TE系列Trititrigia八倍体由杂交后代之间开发的TH.．媒介和常见的小麦品种'yannong 15'（YN15）和继承了许多特征TH.．媒介如穗大、多小花、多分蘖，抗条锈病、白粉病、叶锈病等。因此，这TE系列的Trititrigia八倍体是小麦改良的优良遗传资源[21那26那27那28那29］.

原位杂交（GISH）的基因组通常用于区分普通小麦背景中的外星染色体[30.那31］.什么时候Pseudoroegneria strigosa（2n = 2x = 14，STST）基因组DNA被用作GISH分析中的探针Th。媒介的核型Th。媒介染色体可分为三类。第一组是英石基因组，完全由探针信号标记，第二组是j^S.基因组标记仅在着丝粒区，以及第三组是j基因组仅在子制位置标记[4.那32］.就像GISH一样英石-GenomeDNA探针可以有效地区分三个亚基因组Th。媒介，它被广泛用于识别Th。媒介衍生的小麦种质[19那21那28那33］.

在细胞学研究中，荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)和多色GISH (multicolour GISH, McGISH)通常用于区分不同的染色体，分析染色体构成，检测染色体变异[19那20.那34那35］.揭示小麦染色体中细条纹图案的可用鱼探针包括节节麦克隆PAS1 [36那37，黑麦克隆pSc119.2 [38]，Gaa卫星序列[39]，T. Aestivum.克隆pTa535 [40]等众多的寡核苷酸[41那42］.使用包括PAS1克隆和Gaa卫星序列的鱼探针的组合可以清楚地区分小麦染色体。使用这种鱼探针组合的染色体涂料已经在普通小麦品种的“中国春天”（CS）中实现了[43那44其中A、B和D亚基因组的所有染色体都被标记有特定的信号，其中B和D基因组染色体上的信号特别丰富。通过结合McGISH和FISH分析，可以揭示这些材料中染色体结构变异的位置和特征。

在本研究中，三种染色体体构成和染色体变化Trititrigia研究了表现出良好抗条纹锈病，粉状霉菌和蚜虫的抗抗抗性的八倍体（TE261-1，TE266-1和TE346-1）。遗传特征，三种染色体变异类型Trititrigia使用GISH，FISH，MCGISH和分子标记显示八倍体。

三个染色体体系Trititrigia八滴体

根尖染色体分析表明，TE261-1，TE266-1和TE346-1的染色体数为2N = 56. Observation of meiotic chromosomes in PMCs revealed that most chromosomes in the observed cells formed 28 bivalents at meiotic metaphase I, 14 alien chromosomes formed 7 bivalents were observed in GISH analysis, indicating high cytological stability (Supplemental Fig.1补充表1)．

采用GISH、FISH和McGISH对TE261-1、TE266-1和TE346-1的染色体结构进行鉴定。吉斯(无花果。1-a1）和鱼（图。1-A2）结果表明TE261-1含有42个小麦染色体和14次Th。媒介染色体（图2），包括1双英石-Genome染色体，与探针信号完全标记，一对j-Genome染色体仅在端粒体中标记，三对j^S.-Genome染色体，在Centromere领域具有明显标记，来自中的一对上注染色体j^S.基因组中，和1双J-St.发生易位染色体。这j^S.近端着丝染色体(图。2，补充图。1-A2），首先在TE系列中发现Trititrigiaoctoploids。

结果表明，TE266-1还含有42个小麦染色体和14个Th。媒介染色体（图1-B1，B2，B3和图2)，包括两对英石-基因组染色体，一对j-基因组染色体，三对j^S.-基因组染色体和一对J-St.发生易位染色体。如图所示。1-C1 C2 C3和图2TE346-1也含有42条小麦染色体和14条小麦染色体Th。媒介染色体，包括一对英石-基因组染色体，一对j-基因组染色体，四对j^S.-Genome染色体和一对J-St.发生易位染色体。

三个小麦染色体的变异Trititrigia八滴体

利用FISH分析方法对不同的小麦染色体TE261-1、TE266-1、TE346-1和YN15进行了鉴定，并用标记(GAA)_8.(红色信号)和pAs1(绿色信号)作为探针。采用标记A(绿色信号)和D(红色信号)基因组作为探针，b基因组DNA(灰色)进行阻断，同时进行McGISH分析。小麦染色体的三种变异Trititrigia八滴体与基于鱼类和麦克科模式的普通小麦母体YN15相比。为了一种-Genome染色体，PAS1的杂交信号在1上不可见一种在TE261-1，TE266-1和TE346-1（图3.d）。没有（Gaa）_8.信号在6一种L和额外的PAS1信号在6一种在TE261-1和TE346-1中观察到s次粒状位置，同时只有（Gaa）_8.信号在6一种在TE266-1中观察到L（图。3.d）。

与YN15相比，6的信号B.染色体TE261-1、TE266-1和TE346-1也发生了变化(图3)。3.广告）。在6中检测到PAS1探针的间隙绿色信号B.ste261-1和te266-1，以及6的长度B.S染色体似乎在TE266-1和TE346-1中延伸。微弱的红色（Gaa）_8.在6中也观察到信号B.L染色体在三个中Trititrigiaoctoploids。

信号的信号D.在TE261-1，TE266-1和TE346-1 -genome染色体出现显著变化。FISH和McGISH结果表明，在TE266-1，2-D.用一对染色体被一对广告发生易位染色体;主体部分广告易位染色体来源于2一种而部分长臂则被2取代D.染色体区段（图。3.3 d - b)。

FISH结果显示，7上的原强pAs1信号D.S或7.D.将YN15中的L替换为faint (GAA)_8.和TE261-1、TE266-1、TE346-1中的pAs1信号。McGISH结果表明，7D.TE261-1的染色体片段被替换为一种-genome染色体（图1-a3，图。3.- d)。然而,改变一种-基因组染色体片段位于TE266-1和TE346-1的短臂上，而不是TE261-1的长臂上。来源一种-Genome染色体片段由于缺乏特定的鱼信号而不确定一种-Genome染色体细分。

小麦染色体的特定分子标记使用来验证染色体变异和在三个检测的变化型Trititrigiaoctoploids。用特定标记扩增的YN15的特定带（〜300bp）XMAG3124，位于1一种，未在三个观察Trititrigiaoctoploids(无花果。4.并补充图。4.)．标记检测YN15的特异条带(~ 150 bp)GPW4344，它位于6一种（补充图。2并补充图。4.），三个也没有Trititrigia八倍体，一个6一种检测到TE346-1中不存在的特定带（〜300bp）GPW7465．6B.specific band (~ 200 bp) detected by the markerXGWM219在三个中显示了10bp插入Trititrigiaoctoploids(补充图。2并补充图。4.)．几个特定的​​标记，如结果XGDM77.那XGDM35.那Barc095那Ppd-D1,Xwmc245，位于2D.染色体（图4.，补充图。2并补充图。4.)显示出很大的变化，即在2D.染色体TE266-1，但2D.TE261-1和TE346-1的染色体保持不变。三个特定频段（240,200 bp）在三个中缺席Trititrigia八倍体Barc172和BARC053位于7D.染色体，（图。4.，补充图。2并补充图。4.）， 分别。

用于这16种染色体特异性标记的引物的序列被用来对阵的数据库进行本地爆炸搜查T. Aestivum.（中国春季，CS）全基因组序列。根据筛查标准筛选11个标记，包括适当的染色体，初始位置，终端位置和严格匹配程度（补充表2)．例如，通过爆炸映射的染色体应与PCR检测到的特定染色体匹配;较高的匹配度意味着更好的选择，并且必须匹配引物的3';正向引物初始位置和反向引物终端之间的余量的绝对值应匹配特定频段的大小;最后，挑选了标记映射的适当位置。与筛选后的PCR结果与PCR结果进行比较，用多数标记扩增的特定条带的尺寸相似（图。4.)，但是7D.检测到的特定带（〜240bp）BARC053与BLAST结果（295bp）不同，PPD-D1（R1）的差异存在于PCR（250bp）和BLAST（413bp）中。差异可能归因于CS和YN15之间的序列分集。然后根据其物理位置在染色体上的物理位置，在相应染色体的特定位置标记筛选的标记物在相应染色体的特定位置（补充图。3.)．用标记检测到的变化的位置与6的鱼信号一致一种，6B.L 2D.和7D.染色体，而在1变化一种L以标记检测到端粒，而不是鱼信号。

表型评价三个Trititrigia八滴体

使用小麦父母YN15和成人植物阶段评估对TE261-1，TE266-1和TE346-1的条纹锈病，粉状霉菌和蚜虫的反应，并使用小麦父母YN15和成人植物阶段评估TH.．媒介作为对照（表1)．在苗期，TE261-1，TE266-1和TE346-1是免疫的条锈菌CYR32和白粉病比赛E09性。在成人阶段，所有三个Trititrigia八倍体显示出良好的抗条纹锈和粉状霉菌在田间。TE261-1和TE346-1还显示出成人阶段的蚜虫的中等抗性，而TE266-1和YN15易感。随着常见的小麦父母YN15易于条纹锈，粉状霉菌和蚜虫，而TH.．媒介对所有三个免疫，我们推断出抵抗力Trititrigia来自TH.．媒介．

Th。媒介是小麦族的小麦改善有价值多年生物种由于其许多小麦疾病和害虫的抗性，以及其胁迫耐受性和高杂交性与各种小子物种 [8.那9.那10那11那45］.部分小麦-Th。媒介两簧曲面显示与小麦的高交叉相容性是理想的“桥梁”材料，用于转移所需基因Th。媒介普通小麦[19那20.］.

中期蔓延的染色体计数揭示了这三个八倍体的染色体数量Trititrigia始终如一2n = 56.分子细胞遗传学分析然后揭示了这三个Trititrigia加入所有携带42个小麦染色体和14次Th。媒介染色体和所述外来14（Th。媒介）染色体由混合基因组成j-，j^S.- - -英石-Genome染色体而不是单一的染色体j那j^S.或英石基因组，类似于其他报道的Trititrigiaoctoploids [21那46那47］.混合基因组形成的机制尚不确定，随着寡聚鱼(oligo-FISH)绘画系统等新技术和新方法的发展[48]进一步的研究将有助于阐明辅助的同源关系和完整性j那j^S.和英石基因组的起源和进化Th。媒介．

检测到外星染色体的两种结构变异：J-St.在所有三个中存在的脱位染色体Trititrigiaoctoploids,j^S.TE261-1中的染色体染色体（图。2)，这可能是通过一对的着丝粒断裂而形成的j^S.-genome染色体。J-St.易位染色体也存在于许多TE系列中Trititrigiaoctoploids [21那26那28]， 但j^S.首先在TE系列中发现了上生染色体Trititrigiaoctoploids。这两种变异的形成可能是由于F₁通过远距离杂交获得的杂种用六倍体小麦进行了回复[34］.

虽然三个外星人染色体组成Trititrigia八倍体是不同的，从GISH和FISH信号来看，部分外来染色体可能是相同的。例如,j-基因组染色体的卫星序列和J-St.这三个中旋转染色体Trititrigia八滴体相似。这英石TE261-1染色体也类似于英石-1 TE266-1的染色体，和英石Te346-1的染色体类似于英石-2染色体TE266-1(图2)2)．

除了外星染色体中的结构变异，结构变化，例如1中检测到的变化一种，6一种，6B.，2D.和7D.染色体也发生在小麦染色体中。结果表明，在形成部分两倍倍数的形成期间，小麦染色体由于染色体的细胞患者而丧失了各种类型的染色体重组Th。媒介进入普通小麦染色体，但渗入的片段太小，无法通过GISH检测到。结构变异可能是由不同小麦染色体之间的重组引起的，例如同源染色体之间的重组一种-，B.-， 和D.-Genome染色体，受到的影响Th。媒介染色体。在重复序列的染色体模式（变化例如6号染色体B.)也可能由重复序列重组(扩增/丢失)引起。杂交后，基因组会发生遗传和表观遗传变化(基因组休克)，从而重组其结构。

在1一种和6一种三染色体Trititrigia并且可能是在早期的回复中的相同起源。此外，6的差异有明显的变化B.，2D.和7D.这些染色体Trititrigiaoctoploids，如在6个不同位置PAS1信号B.s在TE266-1和TE346-1和2一种－２D.在TE266-1易位。7的变奏D.三染色体Trititrigia八滴体也不同。麦克风表示部分7D.用TE266-1和TE346-1的S染色体被替换为一种-Genome染色体段，但TE261-1中的相应位置在7D.l染色体。原始位置在7中取代D.L或7.D.S很难通过鱼辨别，因为7的两个臂上的信号D.染色体相似。分子标记分析的结果也支持TE261-1中的鱼和麦克科。需要额外的作品来获得强有力的证据，表明这些染色体重组是如何发生的以及这些染色体变异的效果。

在这三种植物中都发现了大量的染色体变异Trititrigia八滴体，小麦之间的一种通用杂交Th。媒介．但是，我们猜测早期可能存在的剧烈变化可能存在Trititrigia然后与YN15回交，其变异性降低，稳定性提高。我们假设Th。媒介作为天然通用杂种，具有激烈的染色体变异，导致难以确认祖子子样品。

虽然使用（Gaa）组成的一般探针的鱼类结果_8.并且PAS1更丰富，色彩鲜艳，特征，区分大多数常见的小麦染色体，仍然不足以鉴定目前两式吡咯中的外星染色体。李等人。报道了一种有效的寡核鱼涂料系统，用于揭示染色体重排和细胞染色的多倍化[48]，同时使用基于新的比较基因组的寡谱绘画鱼类。这些将是有益的，有助于确定外星人偃对这些多倍体的染色体进行了进一步的研究。

表型评价指示条锈病和白粉病抗性的成功转移从Th。媒介这三个Trititrigiaoctoploids和TE261-1也表现出蚜虫适中的阻力。此外，TE261-1，TE266-1和TE346-1的染色体组成是从其他TE系列不同Trititrigiaoctoploids先前报道[21那26那28］.因此，这些加入可以用作桥父母，用于与小麦交叉以开发添加，取代或易位线，以产生用于小麦育种的新的生锈，粉末状霉菌和蚜虫种质。

三个八倍体Trititrigia通过GISH，FISH，MCGISH和分子标记分析，具有良好的疾病和蚜虫的抗性和蚜虫的耐受性和蚜虫的附加（TE261-1，TE266-1和TE346-1）。分子细胞遗传学分析显示这些Trititrigia加入所有携带42个小麦染色体和14次Th。媒介染色体和14个外星人（Th。媒介）染色体由混合基因组成j-，j^S.- - -英石-Genome染色体而不是单一的染色体j那j^S.或英石基因组。小麦染色体发生了不同的结构变异，如1一种，6一种，6B.，2D.和7D.染色体也是如此。结果表明小麦 -Th。媒介部分两倍吡咯具有14种外来染色体，属于由J-，J的混合基因组成^S.-和St-染色体，以及42条具有不同结构变异的小麦染色体。

植物材料

三Trititrigia选自BC中的八倍增胶质涂层（TE261-1，TE266-1和TE346-1）₁F_8.普通小麦烟农15与Th。媒介和自交世代一些。Th。媒介由原加入中国科学院西北植物研究所，由李志生院士提供;Pseudoroegneria有硬毛的那小麦属植物urartuthum。前甘尔。（2n = 2x = 14，AA.)，山羊草属speltoidesTausch。（2n = 2x = 14，BB.)，节节麦输出电容。（2n = 2x = 14，DD.)和CS缺失四体材料N1AT1B、N6AT6B、N2DT2A、N7DT7A由中国农业科学院作物研究所李丽华研究员提供。

DNA提取，PCR扩增和标记分析

CTAB方法用于从嫩叶中提取总基因组DNA [49] 的Pseudoroegneria strigosa（英石基因组），小麦属植物urartu（一种基因组），山羊草属speltoides（B.基因组）节节麦（D.基因组）。共有176对SSR引物[50那51]（https://wheat.pw.usda.gov）用于鉴定染色体变异。根据BEALES等人进行PCR扩增。[52[并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（页面）进行标记筛选。基于包含包含的数据库，用Blast（基本局部对准搜索工具）分析所选标记小麦（CS）全基因组序列（IWGSC Refseq V1.0，https://wheat-urgi.versailles.inra.fr/morgoth/Seq-Repository/BLAST)，然后用mapgene2染色体v2 (http://mg2c.iask.in/mg2c_v2.0/)．

染色体制片，减数分裂，GISH, FISH和McGISH

从用氧化亚氮处理的发芽种子收集新鲜根尖（n₂O) for 2 h [53然后浸入90%的冰醋酸中固定细胞分裂。根尖细胞染色体片的制备及分析参考Han [46］.当小麦的旗帜叶子蔓延时，幼穗在Carnoy的解决方案中被取样，在MeIso病中的中期I（MI）中的化学物质固定。通过在45％乙酸中敲根和压制花粉和压力，在45％乙酸中的花粉中制备了减数分裂的染色体，之后观察到PMC中磷酶I（MI）中的染色体构型。

英石基因组DNA和D.-基因组DNA用Texas-Red-5-dCTP标记。pAs1克隆(GenBank: D30736.1)是来自中国的一个重复DNA序列(1015 bp)节节麦[37那54］.PASL克隆和一种-基因组DNA用荧光素-12- dutp标记，采用刻痕翻译法。寡核苷酸(棉酚)_8.有5英尺的Tamra由Sangon Biotech（中国上海）合成。Gish，Fish和McGish的程序;信号检测;根据Han等人完成图像集合。[55]和Cui等人。[56］.

用于原位杂交的反应体积为每载玻片10μl。使用50 ng的探针进行GISH 英石-基因组DNA，含6000 ng YN15 DNA块;用5ng (GAA)进行FISH_8.和200 ng pas1;和mcgish用50 ng A-genomeDNA和100​​ ng的探针进行D.基因组DNA和a block of 8000 ngB.- 用DDH稀释至所需总体积的Genome DNA₂O.原位杂交程序包括95°C变性5分钟和55°C杂交6小时。检测FITC(激励滤波器EX465-495，二色镜DM505，障壁滤波器BA515-555)， TRITC(激励滤波器EX540/25，二色镜DM565，障壁滤波器BA605/55)和DAPI(激励滤波器EX340-380，二色镜DM400，障壁滤波器BA435-485)的荧光信号，采用尼康日蚀Ni-U荧光显微镜采集图像;采用NIS-Elements BR 4.00.12软件对图像进行处理。用2X SSC溶液冲洗后，再次进行原位杂交。

对白粉病、条锈病和蚜虫的抗性评价

在植物培养箱中测定了苗期植株抗白粉病和条锈病的能力。用小麦品种辉县红进行接种Blumeria Graminis F.sp。Tritici.（BGT.）致命型E09和条锈菌F。sp。Tritici.（太平洋标准时间）致病型CYR32。TH.irty seeds of the test materials were grown in seedling plates and placed in a plant incubator under 12 h light (25,000 lx) at 25 °C and 12 h of darkness at 17 °C, with 70% relative humidity. Huixianhong and YN15 were used as controls. Inoculation with E09 and CYR32 was achieved by smearing at the one-leaf stage, and the gradient of infection was investigated when Huixianhong had been completely infected; these experiments were repeated three times. The powdery mildew and stripe rust resistances of adult-stage plants were tested via natural infection in an open field. The resistance evaluation criteria for powdery mildew and stripe rust followed the methods of Sheng [57]和李等人。[58］.在白粉病抗性的尺度上，0是免疫的;0;对坏死斑点几乎免疫;1是高度耐药，病变小(< 1 mm)，菌丝薄;2为中等抗性，病变小(< 1 mm)，菌丝稍厚;3是中度易感病变(> 1 mm)和厚菌丝;4是高度敏感的病变(> 1 mm)和连续的厚菌丝。在抗条锈病规模中，0为免疫;0; is nearly immune with tiny flecks; 1 is highly resistant with yellowish-white flecks; 2 is moderately resistant with necrotic plaques around small spore stripes; 3 is moderately susceptible with fading around spore stripes; and 4 is highly susceptible with large spore stripes.

为了鉴定蚜虫抗性，采用自然蚜虫，在小麦籽粒灌装阶段进行评价。用Yn15作为CK的两排播种测试材料，如CK，Th。媒介盆栽种植在附近进行抗蚜性评价。蚜虫伤害调查和抗性分类标准遵循Liu等的方法[59］.测定了10个严重蚜害茎上的蚜虫数量;以该数字为分子，以YN15上的平均蚜虫数为分母，计算比值作为评价标准:0无蚜虫免疫;1为高抗，比例为0.01 ~ 0.30;2为中等抗性，比值为0.31 ~ 0.6;3为微抗性，比值为0.61 ~ 0.90;4略敏感，比值为0.91 ~ 1.2;5为中等敏感，比值为1.21 ~ 1.5;6为高度易感，>为1.5。

在当前的研究中使用和/或分析的数据集可从通信作者在合理的要求。

CS:

中国春天

鱼：

荧光原位杂交

GISH：

基因组原位杂交

McGISH:

多色Gish.

YN15:

yannong 15.

不适用。

国家重点研发计划项目(no . 2016YFD0102000);国家自然科学基金项目(no . 31671675)。关键词:边坡，边坡稳定性，边坡稳定性资助人李兴峰和王红刚构思和设计了本研究。资助机构没有在研究的设计、数据的收集、分析和解释以及手稿的撰写中发挥作用。

作者指出

1. 余翠和丕兴同样贡献了这项工作。

隶属关系

1. 山东农业大学农业大学农业学院作物生物学国家重点实验室，山东271018

   崔宇，邢丕毅，包银光，王红刚，李兴峰

2. 泰安社泰安省，泰安，271000

   小雷齐

3. USDA-ARS Forage＆Range Research Regany，Logan，UT，美国84322-6300

   Richard R.-C.王

贡献

YC, PX进行了实验、数据分析和手稿撰写。XQ, YB, HW参与了一些实验和数据分析。RRCW帮助手稿准备和数据分析。XL设计了项目，参与了稿件的撰写，并通过了最终稿件。作者阅读并批准了最终的手稿。

相应的作者

对应于兴丰力．

伦理批准和同意参与

没有伦理批准和同意参与本手稿。

同意出版物

不适用。

利益争夺

作者声明他们没有利益冲突。

出版商的注意

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