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蚜虫通过调节宿主植物的挥发性轮廓促进病毒传播GydF4y2Ba

BMC植物生物学GydF4y2Ba体积GydF4y2Ba21GydF4y2Ba文章编号:GydF4y2Ba67.GydF4y2Ba（GydF4y2Ba2021.GydF4y2Ba）GydF4y2Ba引用这篇文章GydF4y2Ba

摘要GydF4y2Ba

背景GydF4y2Ba

大多数植物病毒依赖于传播和传播的载体。关于载体病原体 - Symbiont多途径相互作用的突出生物学问题之一是载体共生在病毒传输过程中的潜在参与。在这里，我们使用了一个包含非持久性植物病毒，黄瓜马赛克病毒（CMV）的多因素系统，其主要载体，绿色桃蚜，GydF4y2BaMyzus persicaeGydF4y2Ba，以及专性内共生体，GydF4y2BaBuchnera aphidicola.GydF4y2Ba探索这个未知的领土。GydF4y2Ba

结果GydF4y2Ba

根据我们的初步研究，我们假设蚜虫indosymbiontGydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba可以通过调节植物挥发性成分来促进CMV的传播。基因表达分析表明CMV感染减少GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰富的GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba，其丰度较低GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba与蚜虫从受感染植物向健康植物的偏好转变有关。挥发性成分分析证实，蚜虫取食具有较低的挥发性GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba滴度减少了吸引剂的产生，同时增加了威慑物的排放。因此，GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba改变了感染健康植物的饲养偏好。GydF4y2Ba

结论GydF4y2Ba

我们得出结论，CMV感染减少了GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰富的GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba. 当含病毒蚜虫取食寄主植物时，专性共生体的动态变化导致植物挥发物从吸引转向回避，从而使媒介昆虫的取食偏好从受感染植物转向健康植物。GydF4y2Ba

背景GydF4y2Ba

大多数植物病毒是通过节肢动物媒介如粉虱和蚜虫传播的。植物病毒可以直接或间接地影响载体的生理和行为，促进其传播[GydF4y2Ba1GydF4y2Ba]. 病毒还可以改变植物挥发物，以招募昆虫载体进行有效传播[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba那GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba］．了解病毒传播的调控机制对于揭示植物-病毒-载体的协同进化具有重要意义，并为控制载体限制病毒在植物中的传播提供依据[GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

黄瓜花叶病毒（CMV）是黄瓜病毒科的黄瓜病毒属，是危害性最大的十种植物病毒之一[GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba］．巨细胞病毒可以感染广泛的宿主，包括蔬菜和观赏植物。CMV由超过80种蚜虫以非持久性方式传播。其中,GydF4y2BaMyzus persicaeGydF4y2Ba是最广泛的研究矢量[GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba]. 感染CMV的植株比健康植株释放更多的挥发物，蚜虫被感染植株吸引[GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba］．CMV感染可触发对蚜虫的抗生素，导致病毒获得后蚜虫迅速扩散[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

蚜虫，GydF4y2Ba主要共生细菌，为蚜虫提供必要的氨基酸。反过来，蚜虫提供GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba含氮底物，包括非必需氨基酸在内共生体产生必需氨基酸[GydF4y2Ba10GydF4y2Ba]. 据推测，昆虫的内共生体有助于某些黄体病毒和双生病毒的传播[GydF4y2Ba11GydF4y2Ba那GydF4y2Ba12GydF4y2Ba那GydF4y2Ba13GydF4y2Ba，尽管证据尚存争议[GydF4y2Ba14GydF4y2Ba]。尽管如此，共识是需要额外的研究来证明在不同载体病毒系统中植物病毒传递中的indosmbionts的直接和/或间接参与/效果[GydF4y2Ba12GydF4y2Ba］．到目前为止，角色GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba在诸如CMV的非持久性病毒的传输在很大程度上不清楚。GydF4y2Ba

在昆虫喂养期间，endosymbionts可以改变植物挥发物的数量和质量，以影响他们的昆虫宿主[GydF4y2Ba15GydF4y2Ba]. 此外，植物可以直接针对内共生体来控制其寄主昆虫的行为。最近，Chaudhary等人证明在喂食过程中，GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba在蚜虫唾液诱导的植物防御中，既然蚜虫繁殖会减少[GydF4y2Ba16GydF4y2Ba］．这种相互作用在蚜虫 - 胚乳 - 植物之间可以通过植物网络的调制间接地影响病毒透射[GydF4y2Ba12GydF4y2Ba］．然而，目前有关蚜虫indosymbiont是否参与非持久性植物病毒传输的有限信息。我们以前的结果表明CMV感染增强了植物防御和减少的蚜虫繁殖力[GydF4y2Ba17GydF4y2Ba］．之前，我们发现巨细胞病毒感染可以改变其昆虫媒介的取食偏好，GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba，来自感染健康的植物。建立初步研究，我们假设蚜虫indosymbiontGydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba可能通过调节植物挥发性成分来影响食草动物的行为。GydF4y2Ba

为了检查这一假设，我们进行了以下目的来研究感染和健康植物之间的毒性蚜虫的1）宿主偏好;2）GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2BaCMV感染和利福平治疗的丰度GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba， 分别;3）CMV感染和未感染的宿主植物的挥发性谱无感染或受健康，CMV感染和利福平治疗的GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba;4）来自目标-3的所得挥发物的功能。GydF4y2Ba

结果GydF4y2Ba

感染和健康植物之间蚜虫的宿主偏好GydF4y2Ba

的数量GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba感染CMV的植株显著低于健康植株（FGydF4y2Ba1,16GydF4y2Ba = 4.975,GydF4y2BaP.GydF4y2Ba < 0.001, Fig.1GydF4y2Baa） ，而非病毒性GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba在CMV感染的植物上显着高于健康植物（F.GydF4y2Ba1,16GydF4y2Ba = 2.602,P.GydF4y2Ba = 0.005，图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bab），表明CMV感染的蚜虫优选的健康植物。GydF4y2Ba

图1GydF4y2Ba
图1GydF4y2Ba

蚜虫对受感染植物和健康植物的偏好。GydF4y2Ba一种GydF4y2Ba．CMV感染的蚜虫。GydF4y2BaB.GydF4y2Ba．非感染的蚜虫GydF4y2Ba．GydF4y2Ba数值为平均值±SE。不同的字母表示显着差异（GydF4y2BaP.GydF4y2Ba< 0.05)GydF4y2Ba

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Buchnera aphidicola.GydF4y2BaCMV感染和利福平治疗的蚜虫中丰富GydF4y2Ba

Buchnera aphidicola.GydF4y2Ba序列，长度为1845-BP，与...共享99.9％GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba序列来自GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba基因组（登录号：CP002703,275,749-276,779GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba基因组）。GydF4y2Ba

巨细胞病毒感染显著降低了丰度GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba，和GydF4y2Ba布奇内拉GydF4y2BaCMV感染蚜虫的丰度显着低于对照蚜虫（F.GydF4y2Ba1、4GydF4y2Ba = 2.474,P.GydF4y2Ba < 0.001). Similarly,B.蚜虫索拉GydF4y2Ba在利福平治疗后也显着降低（F.FGydF4y2Ba4, 14GydF4y2Ba = 71.708,GydF4y2BaP.GydF4y2Ba < 0.001），呈剂量依赖性。与对照组相比，GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰富的GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba200处理 μg/mL利福平减少> 2倍（图。GydF4y2Ba2GydF4y2Ba）。GydF4y2Ba

图2GydF4y2Ba
图2.GydF4y2Ba

Buchnera aphidicola.GydF4y2Ba丰富的利福平治疗的蚜虫。索引GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰富，扩增子的比例GydF4y2BaB蚜虫GydF4y2Ba确定基因/EF1α基因。数值为平均值±SE。不同的字母表示显着差异（GydF4y2BaP.GydF4y2Ba<0.05）通过ANOVA和TUKEY的HSD后HSD测试GydF4y2Ba

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植物挥发物的分布GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba随着减少的GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰度GydF4y2Ba

挥发性成分的分布在质量上相似，但在数量上不同。与健康植株相比，受健康蚜虫侵染的健康植株释放的α-蒎烯、γ-松烯的效价显著高于健康植株；受利福平处理的蚜虫侵染的健康植株释放的α-蒎烯、γ-松油烯、σ-伞花烯和2-辛醇的效价显著较高，而苯甲醇和σ-二甲苯的效价显著较低；CMV侵染植株显著提高了苯甲醇和σ-二甲苯的效价，而显著降低了σ-异丙苯和2-辛醇的效价；健康蚜虫侵染CMV的植株和利福平处理蚜虫侵染CMV的植株均显著提高了α-蒎烯、β-蒎烯、γ-松烯、σ-异丙苯和2-辛醇的效价，而苯甲醇和σ-二甲苯的效价显著降低（图。GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba）。GydF4y2Ba

图3GydF4y2Ba
图3.GydF4y2Ba

不同治疗中植物挥发物的含量。NI-P-UI：无感染的对照植物;NI-P-IC：由健康蚜虫感染的未感染植物;Ni-P-IRT：由利福平治疗的蚜虫感染的未感染植物;I-P-UI：CMV感染植物;I-P-IC：受到健康蚜虫的CMV感染植物;I-P-IRT：由利福平治疗的蚜虫感染CMV感染植物。GydF4y2Ba一种GydF4y2Ba．α-凸烯，β-屈烯，γ-萜烯，σ-cyhene和2-辛醇的植物挥发物在不同治疗中的植物中。GydF4y2BaB.GydF4y2Ba. 苯甲醇和σ-二甲苯的植物挥发物，在不同处理的植物上。GydF4y2BaCGydF4y2Ba．不同处理下1-丁醇、3-己烯-1-醇和1-己醛的植物挥发物。数值为平均值±SE。星号表示显着差异（GydF4y2BaP.GydF4y2Ba < 0.05），通过方差分析和Tukey的HSD事后检验GydF4y2Ba

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合成挥发物的功能分析GydF4y2Ba

在Y管分析中，健康人、CMV感染者和利福平治疗者GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba由2-辛醇，O-CYMENE，α-折烯，β-折烯和γ-萜烯显着排斥，同时由苄醇和σ-二甲苯显着吸引。至于3-己酮-1-醇，1-丁醇和N-己醛，健康，CMV感染和利福平治疗GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba没有显示任何偏好（图。GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba）。GydF4y2Ba

图4GydF4y2Ba
图4.GydF4y2Ba

受挥发物影响的蚜虫偏好。GydF4y2Ba一种GydF4y2Ba．健康的蚜虫的偏好。GydF4y2BaB.GydF4y2Ba．CMV-infected蚜虫的偏好。GydF4y2BaCGydF4y2Ba．利福平治疗的蚜虫的偏好。GydF4y2BaD.GydF4y2Ba．健康的蚜虫的偏好。GydF4y2BaE.GydF4y2Ba．CMV-infected蚜虫的偏好。GydF4y2BaFGydF4y2Ba．利福平治疗的蚜虫的偏好。GydF4y2BaGGydF4y2Ba．健康的蚜虫的偏好。GydF4y2BaHGydF4y2Ba．CMV-infected蚜虫的偏好。GydF4y2Ba一世GydF4y2Ba．利福平治疗的蚜虫的偏好。数值为平均值±SE。星号表示显着差异（GydF4y2BaP.GydF4y2Ba < 0.05) between volatile standard and control by a general linear model. n.s. indicates not significant between volatile standard and control

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讨论GydF4y2Ba

植物病毒可以影响其昆虫载体的宿主选择行为，以促进病毒传输[GydF4y2Ba18GydF4y2Ba那GydF4y2Ba19GydF4y2Ba]，例如在感染蚜虫载体中增加的alate生产[GydF4y2Ba17GydF4y2Ba那GydF4y2Ba20GydF4y2Ba]. 近年来，植物病原菌、昆虫载体和植物寄主之间的多营养相互作用已经扩展到第四方：昆虫载体中的细菌共生体[GydF4y2Ba12GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

感染cmv的蚜虫的取食偏好的改变有利于病毒的传播GydF4y2Ba

预计大多数植物病毒可以诱导植物的变化，该植物具有通过昆虫载体传播的积极影响[GydF4y2Ba21GydF4y2Ba］．在这里，被cmv感染的蚜虫被吸引到健康的植物而不是被cmv感染的植物上，并且先前的研究GydF4y2Ba棉蚜GydF4y2Ba有翅植物也表现出从CMV感染到模拟接种的转变倾向[GydF4y2Ba22GydF4y2Ba]. 此外，当蚜虫暴露于CMV感染的植物时，其探测行为随时间发生了急剧的变化[GydF4y2Ba22GydF4y2Ba］．理论上，健康植物上的CMV感染蚜虫数量增加将促进现场的病毒传播。然而，由非持久性植物病毒介导的蚜虫移位偏好的机制在很大程度上是未知的。GydF4y2Ba

CMV感染减少了相对丰富的GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba在GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba

我们的RT-qPCR分析显示CMV感染降低了病毒的相对丰度GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba在GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba．在平行实验中，利福平治疗，毫不奇怪，显着降低了GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba滴度GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba，这与以前的研究结果一致[GydF4y2Ba23GydF4y2Ba］．虽然细菌内酯在GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba可能是丰富多样的，我们只检测到GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba下列的 [GydF4y2Ba24GydF4y2Ba］．没有其他的共生体，比如GydF4y2Ba里克塞西亚GydF4y2Ba那GydF4y2Ba汉里顿菌，Wolbachia，GydF4y2Ba和GydF4y2Ba螺旋体瘤，GydF4y2Ba在本研究中检测。然而，有趣的是，减少的水平GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰富的GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba感染巨细胞病毒的蚜虫与最高浓度的抗生素(200 μg/mL利福平;无花果。GydF4y2Ba2GydF4y2Ba）。尽管如此，蚜虫的最终选择最终有利于病毒的传播和传播，在与其昆虫载体的共同进化过程中对病毒的表观激励。GydF4y2Ba

减少GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba蚜虫中的滴度导致植物挥发物的定量变化GydF4y2Ba

植物通常通过释放一种特定的混合挥发物来应对食草动物的攻击[GydF4y2Ba25GydF4y2Ba]. 先前的研究表明，CMV感染植物释放的挥发物在性质上与健康植物释放的混合物相似[GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba]，这与我们的结果一致。一些萜烯通常排斥节肢动物的食草动物，如σ-伞花烯、α-蒎烯、β-蒎烯和γ-萜烯[GydF4y2Ba26GydF4y2Ba那GydF4y2Ba27GydF4y2Ba那GydF4y2Ba28GydF4y2Ba那GydF4y2Ba29GydF4y2Ba，这与我们的结果是一致的。然而，在我们的研究中，σ-二甲苯吸引蚜虫，却阻止了白蝇，GydF4y2BaBemisia Tabaci.GydF4y2Ba（Gennadius）[GydF4y2Ba30.GydF4y2Ba］．差异可能取决于昆虫物种。马克等人。（2010）表明，首先被CMV感染的植物吸引了蚜虫，并且当被迫饲喂受感染的植物时，从感染的植物移植到CMV感染的植物，并表现出群体增长降低，表明宿主可口症的降低导致CMV感染蚜虫的快速分散[GydF4y2Ba31.GydF4y2Ba］．在这里，我们发现CMV感染的植物释放出更高滴度的有吸引力的植物挥发性，而CMV感染植物受到健康蚜虫的感染GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba- 诱导驱虫挥发性的蚜虫，减少了吸附挥发物，并且该现象也可以解释CMV感染蚜虫的快速分散。结果可能会在现场条件下变化。这种效果可能是间接的，因为可以诱导健康植物的更高的吸引力只是为了限制病毒的昆虫感染，因为毒性的状态妨碍了蚜虫生命周期。因此，这些蚜虫可以被健康植物吸引只是为了逃避进一步的病毒感染，这可能间接诱导实际传输。GydF4y2Ba

蚜虫之间的共生关系，GydF4y2BaM. persicae，GydF4y2Ba及其主要symbiont，GydF4y2BaB蚜虫，GydF4y2Ba是有义务，其中合作伙伴无法在没有另一个的情况下生存。通过减少丰富GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba，整体健身GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba被妥协。CMV通过向免疫功能（感染）和营养完整（健康）宿主植物之间的昆虫载体提供选择来利用这种情况。与此同时，减少GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰度从数量上改变了植物的挥发性成分，从而确定了有利于病毒传播的昆虫载体的选择方向（图。GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba）。GydF4y2Ba

图5GydF4y2Ba
图5.GydF4y2Ba

CMV暴发的建议模型由GydF4y2BaB蚜虫-GydF4y2Bacmv感染蚜虫取食偏好的介导转移第一阶段:cmv感染的蚜虫喜欢以健康的植物为食。第二阶段:取食后，寄主植物被感染，并且GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2BaCMV感染蚜虫的丰度降低。III阶段：感染后，植物挥发性谱的动态发生变化，吸引剂较少，更驱散剂。结果，蚜虫移位从感染到健康植物的喂养偏好。IV阶段：CMV感染蚜虫的分散导致CMV爆发GydF4y2Ba

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在昆虫载体的植物病毒以非持续的方式的传播过程中，据信植物病毒被认为是在昆虫的探针中。该领域的辩论是昆虫indosymbionts是否参与了非持久性病毒传输的过程。基于这项研究，我们提出了一个简单的模型GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba在CMV传播中的作用。该模型体现了蚜虫从CMV感染植物到非感染植物的偏好转移动态。这个GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba毒性蚜虫的丰度降低影响植物挥发性型材，导致蚜虫偏好从感染到健康植物的偏移，并且最终导致CMV爆发（图。GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba）。GydF4y2Ba

结论与观点GydF4y2Ba

迄今为止，昆虫内共生体如何调控病毒的循环传播一直是人们关注的焦点GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba可以保护曲司杆菌免受病毒传播期间蚜虫血淋巴中的降解[GydF4y2Ba32.GydF4y2Ba]. 在这项研究中，我们发现GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba也有助于传播非持久性植物病毒，以不同的方式。GydF4y2Ba

这是第一研究凭经验检查植物挥发物的CMV感染蚜虫的末端的末端的研究之一，以操纵蚜虫偏好和CMV透射。我们作证说，Symbiont参与了非持久性病毒传输。我们得出结论，减少GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2BaCMV感染的蚜虫的丰度降低了吸引力的挥发性的量，并增加了排斥挥发性的量，以间接导致CMV感染的蚜虫分散。indosymbiont介导的挥发性变化将使毒性的蚜虫转化为健康的植物，从而为传播病毒传播病毒提供更多机会，这对于CMV来说至关重要并适应矢量传统的生活方式。GydF4y2Ba

方法GydF4y2Ba

寄主植物、蚜虫菌落和CMV培养GydF4y2Ba

绿色桃蚜，GydF4y2BaMyzus persicaeGydF4y2Ba（Sulzer），是来自中国农业大学的Xiwu Gao博士的礼物，一直在辣椒厂维持，GydF4y2Ba一年生辣椒GydF4y2BaL.，（中国农业科学院中焦5）。本研究中使用的样品的正式鉴定由小斌Shi进行。优惠券标本沉积在湖南植物保护学院的植物标目中。CMV-隔离（子组IB，存储在-80°C中）GydF4y2Ba烟草需GydF4y2Ba）在4-5阶段接种到辣椒植物中[GydF4y2Ba17GydF4y2Ba］．使用同样发展阶段的健康胡椒作为对照。经过9天后，通过双夹心酶联免疫吸附测定（Das-ELISA）确认病毒感染[GydF4y2Ba17GydF4y2Ba］．通过允许产生CMV感染的蚜虫GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba在CMV感染植物上喂5分钟[GydF4y2Ba33.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

感染和健康植物之间蚜虫的宿主偏好GydF4y2Ba

在偏好测试中使用CMV感染的蚜虫和无感染的蚜虫。将CMV感染和健康的胡椒植物置于两个单独的收集罐中。Y管嗅觉计的两个臂通过真空线连接到两个相应的罐。在Y管的底部释放单个蚜虫。观察到每个蚜虫不超过20分钟。当蚜虫移动> 10厘米到任一臂上并保持在该臂至少5分钟时，记录一个选择，并且当蚜虫在测试期间保持无效时，记录“否选择”。测试五个蚜虫后，切换了气味源以避免设置的任何不可预测的不对称性。每天测试90例CMV感染和未感染的蚜虫3次，3天。用95％乙醇小心地擦拭Y管的内和外臂，每天干燥。GydF4y2Ba

利福平治疗的建立GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba和量化GydF4y2BaBuchnera aphidicola.GydF4y2Ba蚜虫GydF4y2Ba

利福平治疗GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba通过在人工饲料中添加浓度为10、50、100和200的利福平来维持蚜虫 48μg/mL 小时[GydF4y2Ba23GydF4y2Ba那GydF4y2Ba34.GydF4y2Ba］．对照蚜虫在规则的人工饮食中保持48小时。48小时后，GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba丰度测定。GydF4y2Ba

猪的基因组DNAGydF4y2BaMyzus persicaeGydF4y2Ba用Chelex（Sigma-Aldrich，St Louis，Mo，USA）提取后提取[GydF4y2Ba35.GydF4y2Ba］．这里，使用聚合酶链式反应（PCR）基于诊断工具来鉴定indosymbiontsGydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba，包括GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba那GydF4y2Ba里克塞西亚GydF4y2Ba那GydF4y2Ba防御哈密顿内拉GydF4y2Ba那GydF4y2Ba沃尔巴克氏菌GydF4y2Ba， 和GydF4y2Ba螺旋体瘤GydF4y2Ba（桌子GydF4y2Ba1GydF4y2Ba）。使用爆炸克隆，测序并确认所得的PCR产物。只有1845年的BP地区GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba被放大和证实。丰富的GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba在毒性和控制蚜虫中估计了比例GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba放大器GydF4y2BaBuch.GydF4y2Ba(正向引物:AGCGGCCTCCTAAACGAAAA;反向引物:AGTCGACATCGTTTACGGCA) /GydF4y2BaEF1αGydF4y2Ba（正面底漆：Agaatggaaacccgtgaa；反向引物：cactgtatggtgtcagtag）使用RT-qPCR[GydF4y2Ba36.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba37.GydF4y2Ba］．对于RT-QPCR分析，对每个实验进行三种生物重复。对于每个生物复制，包括四种技术复制。相对表达GydF4y2BaBuch，GydF4y2Ba靶基因被标准化为GydF4y2BaEf1α，GydF4y2Ba内部参考，使用2 - ΔΔCT方法[GydF4y2Ba38.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

表1用于检测细菌内共生体的诊断引物GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba
全尺寸表GydF4y2Ba

植物挥发性分析GydF4y2Ba

用于收集挥发物，包括健康植物，用对照蚜虫感染的健康植物，用利福平治疗（200μg/ mL）蚜虫，CMV感染植物，CMV感染植物感染健康植物用对照蚜虫的感染植物，和CMV感染的植物用利福平处理的（200μg/ ml）蚜虫侵入。收集所有治疗的植物挥发为6小时，蚜虫侵蚀在6小时内保持夹子，并且还用夹子笼处理了非侵染植物。对于每种处理，挥发性收集是独立复制三次的，包括每种生物重复的三种技术复制。GydF4y2Ba

寄主植物挥发物的功能分析GydF4y2Ba

健康、cmv感染和利福平治疗的反应GydF4y2BaM. persicae.GydF4y2Ba用y管嗅觉仪测定10种挥发物的含量。y管试验包括3-己-1-醇、1-丁醇、正己醛、苯甲醇、σ-二甲苯、2-辛醇、邻伞花烃、α-蒎烯、β-蒎烯和γ-松蒎烯。两股净化空气(通过活性炭过滤)通过两个玻璃容器(一个标准化学品和一个净化空气作为对照)，以100毫升/分钟的速度进入y形管嗅觉仪的两支臂。蚜虫偏好试验参照“带毒蚜虫在染病植株与健康植株间的寄主偏好”一节的方法进行。对于每一种治疗，90只健康的、cmv感染的和利福平处理过的蚜虫被测试，每天3次，连续3天。共用2700只蚜虫检测了10种合成挥发物的作用。GydF4y2Ba

统计分析GydF4y2Ba

所有统计分析均采用SPSS版本20.0（美国伊利诺伊州芝加哥市SPSS公司）。用一个样本t检验比较了CMV感染蚜虫的偏好性，并比较了两者的差异GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba放大器GydF4y2BaBuch.GydF4y2Ba/EF1α在CMV感染和控制蚜虫中。单向ANOVA用于比较GydF4y2BaB.蚜虫索拉GydF4y2Ba放大器GydF4y2BaBuch.GydF4y2Ba/EF1α在0、10、50、100和200 μg/mL浓度下对利福平处理的蚜虫的影响。采用单因素方差分析(one-way ANOVA)比较了不同处理植物挥发性物质的释放情况。用一般线性模型(General linear model, GLM)比较了10种植物挥发物对健康蚜虫、cmv感染蚜虫和利福平处理蚜虫偏好的影响。GydF4y2Ba

可用性数据和材料GydF4y2Ba

本研究中使用和/或分析的数据集可根据合理要求从相应作者处获得。GydF4y2Ba

缩写GydF4y2Ba

CMV：GydF4y2Ba

黄瓜花叶病毒GydF4y2Ba

AGO1公司：GydF4y2Ba

Argonaute1.GydF4y2Ba

DAS-ELISA：GydF4y2Ba

双三明治酶联免疫吸附试验GydF4y2Ba

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下载参考GydF4y2Ba

致谢GydF4y2Ba

作者感谢匿名评论者的建设性意见和建议。GydF4y2Ba

基金GydF4y2Ba

这项工作得到了湖南自然科学基金会（2019JJ30014），中国农业研究系统（Cars-16-E-17，Cars-23-D-02），中国国家自然科学基金（第32030088号），32072383,31872932,31901854）。资助者在研究设计中没有作用;在收集，分析或编写数据中;在写作稿件，或在决定发布结果。GydF4y2Ba

作者信息GydF4y2Ba

从属关系GydF4y2Ba

  1. 湖南省农业科学院湖南省湖南省园林园艺作物害虫管理实验室，长沙，410125GydF4y2Ba

    萧斌施，硕艳，李敏郑，舒娥孙，杨高，新邱谭＆de-yong zhangGydF4y2Ba

  2. 肯塔基大学昆虫学系，KY莱克星顿，40546，美国GydF4y2Ba

    志张徐国周GydF4y2Ba

  3. 湖南农业科学院蔬菜研究所，长沙，410125GydF4y2Ba

    詹红张GydF4y2Ba

作者GydF4y2Ba
  1. 小斌施GydF4y2Ba
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  2. 朔燕GydF4y2Ba
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  3. Chi Zhang.GydF4y2Ba
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  10. 徐国洲GydF4y2Ba
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    您也可以在中搜索此作者GydF4y2BaPubMed.GydF4y2Ba谷歌学者GydF4y2Ba

贡献GydF4y2Ba

XBS，Dyz和XGZ构思了研究和贡献的想法。XBS，SY和YG进行了实验，SY，ZHZ，SES，LMZ，XQT和XGZ分析了数据。XBS，CZ和XGZ写了稿件。所有作者均阅读并批准了手稿。GydF4y2Ba

通讯作者GydF4y2Ba

对应到GydF4y2Ba张德勇GydF4y2Ba或GydF4y2Ba徐国洲GydF4y2Ba．GydF4y2Ba

道德宣言GydF4y2Ba

伦理批准和同意参与GydF4y2Ba

不适用。GydF4y2Ba

同意出版物GydF4y2Ba

不适用。GydF4y2Ba

利益争夺GydF4y2Ba

作者声明他们没有相互竞争的利益。GydF4y2Ba

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Shi，XB。，燕，S.，张，C。GydF4y2Ba等等。GydF4y2Ba蚜虫indosymbiont通过调节宿主植物的挥发性轮廓来促进病毒传播。GydF4y2BaBMC植物BIOL.GydF4y2Ba21,GydF4y2Ba67（2021）。https://doi.org/10.1186/s12870-021-02838-5GydF4y2Ba

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关键词GydF4y2Ba

  • Myzus persicaeGydF4y2Ba
  • Buchnera aphidicola.GydF4y2Ba
  • 黄瓜花叶病毒GydF4y2Ba
  • 植物挥发性GydF4y2Ba
  • 多营养互动GydF4y2Ba

BMC植物生物学GydF4y2Ba

ISSN:1471-2229GydF4y2Ba

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