magnaporthe oryzae.GydF4y2Ba系统防御触发1 (MoSDT1)介导的代谢产物调控水稻的防御反应GydF4y2Ba

背景GydF4y2Ba

一些致病效应蛋白在刺激植物防御系统以加强植物抵抗力方面发挥着积极作用。GydF4y2Ba

结果GydF4y2Ba

在该研究中，实施超高性能液相色谱 - 四极杆上飞行时间质谱法（UHPLC / Q-TOF-MS）以鉴定含有过表达的转基因水稻中的改变的代谢物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在三次点处感染的系统防御触发器1（MOSDT1）。所表征的主导代谢物是有机酸及其衍生物，有机氧化合物，脂质和脂质样分子。在鉴定的代谢物中，Shikime，吡啶醇，海藻糖，D-甘露糖，亚麻酸，多巴胺，酪胺和L-谷氨酰胺是合成许多二级防御代谢物碳水化合物的前体，以及氨基酸代谢，途径被揭示参与植物防御反应和抵抗力。GydF4y2Ba

结论GydF4y2Ba

水杨酸（SA）和茉莉酸（JA）含量增强Ja合成/信号态基因，SA合成/受体基因，奖酶/果糖/蔗糖合成酶基因以及细胞壁相关基因之间的相互作用均导致水稻中的防御反应。米饭之后的症状GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba6种确定的代谢物(即半乳糖醇、酪胺、l -谷氨酰胺、l -色氨酸、α-松油烯和多巴胺)外源性处理72 h后，感染明显减轻。因此，这些代谢物可以作为最理想的代谢标志物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba防御。GydF4y2Ba

植物病原体利用分歧机制来感染植物;然而，所有策略都需要将效应分子释放到植物细胞中以引发成功的感染和殖民化。另一方面，它已经充分记录了植物采取两条免疫防御反应的路径，以反应毒性感染[GydF4y2Ba1GydF4y2Ba]. 第一种防御机制是病原体相关分子模式/微生物相关分子模式（PAMP/MAMP）触发的下游基因引起无症状或非小H反应，即PAMP模式触发免疫（PTI）或非宿主抗性[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba那GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba］．第二种防御机制是致病效应蛋白触发下游基因，导致种族特异性H反应，即效应触发免疫(efftor -triggered immunity, ETI)或垂直抗性[GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba]. 然而，对植物抗性的生化机制和遗传背景的理解仍然是难以捉摸的。基于生化机制的植物病害精确防治策略也未见报道。GydF4y2Ba

植物的代谢信号在植物抗侵染系统中起着重要的生理和生化作用，是提高植物抗病性的一个很有前途的方向[GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba］．植物产生的代谢物是对外界胁迫最直接的反应产物。这些直接产物在胁迫状态下通过植物的症状表型表现出来。碳水化合物和氨基酸是植物对抗逆境的主要代谢产物[GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba］．当病原真菌感染植物时，植物组织中的糖分水平升高，激活植物的防御反应，参与调节植物免疫系统的激素信号网络，诱导植物对病原菌表现出更强的抗性[GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba］．不同的有机氧气化合物[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba),脂质(GydF4y2Ba10.GydF4y2Ba,苯环型的GydF4y2Ba11.GydF4y2Ba]，和有机酸[GydF4y2Ba12.GydF4y2Ba]在植物防御反应中起着重要的作用。当植物被病原菌感染时，会激活碳水化合物代谢、氨基酸代谢、半乳糖代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、ABC转运体等重要的代谢通路[GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba］．因此，了解碳水化合物代谢、氨基酸代谢和ABC转运体的相关途径，可以为构建更特异的转基因平台，加强植物抗性系统提供启发。GydF4y2Ba

代谢组学在植物与病原体相互作用研究中的应用取得了显著进展[GydF4y2Ba13.GydF4y2Ba]. 通过进行代谢组学分析，某些代谢物可以被鉴定，并作为潜在的生物标志物在感染反应中使用GydF4y2Ba5种GydF4y2Ba在番茄中[GydF4y2Ba14.GydF4y2Ba]. 通过对苯丙氨酸、尿囊素、谷氨酸、硫胺、甘氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、海藻糖等重要的次生防御代谢产物进行合成前体的应用，植物不仅可以生长，而且可以增强抗性[GydF4y2Ba15.GydF4y2Ba］．根据代谢组学数据，选择关键代谢物作为植物的外源处理，有利于植物的生长和抗性，有利于农田环境保护，也有利于低/零农药。因此，外源代谢物在植物病害环境防治中具有很大的应用潜力。外源表达效应基因的转基因植物可作为鉴定植物有效抗性资源的理想模型。植物在分子水平上增强抗性的机制已经被规范[GydF4y2Ba16.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba17.GydF4y2Ba]，但目前还没有报告可以解释提高抗性的生化机制。在之前的报道中发现，转基因mosdt1水稻的生长与野生型水稻的生长大致相当;然而，抵抗GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2BaMOSDT1-TRANEGANIC RIS显着改善[GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba］．UHPLC-Q-TOF MS用于鉴定代谢物和代谢途径改变GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在不同时间点感染MOSDT1-转基因水稻，表征了响应于感染释放的关键代谢物，并分析了在MOSDT1-转基因水稻中与防御相关基因的综合基因的主要代谢物表达。我们使用标准产品作为防御性代谢物的替代品，以治疗野生型米饭（它是预先接种的米饭GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba72 h后用雾化化合物进行喷雾处理)，然后记录症状GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba并确定了这些关键防御代谢物在提高水稻抗性中的作用。本研究揭示了转基因水稻侵染mosdt1后提高抗病性的生化机制GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba并为未来预防植物疾病提供基本数据。GydF4y2Ba

接种稻瘟病菌的转基因株系MoSDT1的差异代谢产物鉴定GydF4y2Ba

的主要代谢物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2BaMoSDT1来华的GydF4y2Ba-GydF4y2Ba利用UHPLC-Q-TOF ms对0 h、72 h和120 h的转基因水稻进行了鉴定GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在MoSDT1中鉴定出154个差异代谢物GydF4y2Ba-GydF4y2Ba被感染时转基因米饭GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在0的时间点 h（补充表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba). 其中95个上调，22个为有机酸及其衍生物，17个为有机氧化合物，6个为脂类和类脂分子，32个未分类（表1）GydF4y2Ba1GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．另一方面，59个是下调的代谢产物，其中3个是有机氧化合物，2个有机酸及其衍生物，3个脂类和类脂分子，49个是未分类的(表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．孵育72 h后，鉴定出138种差异代谢物(补充表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba），其中95个是上调的，16种有机氧化合物，14个有机酸和衍生物，10个核苷酸和类似物，8个脂质和脂质样分子，5个苯并曲线和32个未分类（表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．在43个下调的代谢物中，10个是有机酸及其衍生物，5个是有机氧化合物，4个是有机杂环化合物，18个代谢物没有分类(表)GydF4y2Ba1GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．总共110个差分代谢物（补充表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba）和68个上调的代谢物在120小时内鉴定，其包括18个有机氧化合物，15种有机酸和衍生物，10个脂质和脂质样分子，15个未分类（表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．此外，下调42种代谢物，包括6种脂质和脂质样分子，6种有机酸和衍生物，16个未分类（表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．在该研究中，在三个时间点（0h，72小时和120小时）鉴定上调的代谢物。MOSDT1GydF4y2Ba-GydF4y2Ba转基因水稻感染GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba主要显示有机酸和相应的衍生物，有机氧化合物，脂质和脂质样分子。它根据先前的研究，还发现植物中的氨基酸，有机酸和碳水化合物中的主要代谢改变也发现了主要的代谢改变。GydF4y2BaBipolaris oryzaeGydF4y2Ba那GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba等等[GydF4y2Ba19.GydF4y2Ba]. 此外，这一结果与细胞因子上调的防御反应代谢物一致GydF4y2Ba辣椒GydF4y2Ba感染米[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

用抗菌菌株挑战MOSDT1转基因线的主要防御代谢物分析GydF4y2Ba

该研究分析了回应的差异代谢物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在0 h、72 h和120 h时对转基因水稻进行侵染(补充表GydF4y2Ba1GydF4y2Ba). 半乳糖醇、D-甘露糖、莽草酸、甘油酸和蔗糖属于有机氧化合物，L-谷氨酰胺和L-色氨酸属于有机酸和衍生物，苯类化合物中的水杨酸、未分类的D-生物素和喜树碱代谢物在三个时间点都显示出显著的积累（补充表）GydF4y2Ba1GydF4y2Ba)．脂类和类脂分子中的亚麻酸和亚油酸、有机氧化合物中的棉子糖、苯类化合物中的酪胺和未分类的α -蒎烯在72 h显著富集。有机酸及其衍生物中的草酸含量在72 h时下降，其余两个时间点均检测不到草酸。0 h和120 h时，苯类中邻氨基苯甲酸和多巴胺显著积累。有机氧化合物[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba]、脂类和类脂分子[GydF4y2Ba10.GydF4y2Ba,苯环型的GydF4y2Ba11.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba12.GydF4y2Ba]中检测到许多未分类的代谢物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-Infected MOSDT1-转基因耐水稻。这些是核心防御代谢物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-感染了大多数转基因植物。GydF4y2Ba

稻瘟病菌攻击MoSDT1转基因株系的富集途径分析GydF4y2Ba

在0小时GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba感染MoSDT1转基因水稻后，KEGG富集的差异代谢产物包括22条途径，其中7条属于氨基酸代谢途径（补充表）GydF4y2Ba2GydF4y2Ba），10属于碳水化合物代谢途径（补充表GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba其中4个属于核代谢途径（补充表GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba)和ABC运输工具（补充表GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba). 72岁 h、 差异代谢产物富集KEGG主要由15条途径组成，其中5条为氨基酸代谢途径（补充表）GydF4y2Ba2GydF4y2Ba)，7属于碳水化合物代谢途径（补充表）GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba)2个属于氮代谢途径（补充表）GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba)和ABC运输工具（补充表GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba)．在120小时，有12种差分代谢物富集途径，其中只有一个属于氨基酸代谢途径（补充表GydF4y2Ba2GydF4y2Ba)，7属于碳水化合物代谢途径（补充表）GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba）和2属于氮代谢（补充表GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba)和ABC运输工具（补充表GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba)．在接种或不接种blast株的mosdt1转基因株系中，更多的差异代谢物参与了主要KEGG通路(补充表)GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba)．结果表明，在感染过程中激活了这些代谢途径。Suharti等。（2016）报道说，碳水化合物代谢途径和氨基酸代谢途径是当耐药耐热时受调节的主要途径GydF4y2Ba辣椒GydF4y2Ba[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba］．本研究通过对差异代谢物KEGG富集分析，也在三个时间点对这两条途径进行了鉴定，进一步证实了转mosdt1基因水稻的抗性增强。GydF4y2Ba

代谢防御响应/合成基因表达分析GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-infected mosdt1-转基因米饭GydF4y2Ba

基因水平，GydF4y2Ba奥斯洛克斯1/ 3.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Baa、b),GydF4y2BaOsOPR1/7GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bac、 d）、，GydF4y2BaOsJMT1型GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bae） ，和GydF4y2Baoshpl3.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Baf) RT-qPCR检测到转mosdt1基因水稻中茉莉酸(JA)合成途径相关基因在72 h显著上调。涉及JA信号通路的基因，如GydF4y2BaOsCOI1b公司GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bag),GydF4y2BaOsJAZ1GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bah） 哦，GydF4y2BaOsJAZ9GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Ba我和GydF4y2BaOsMYC2型GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Baj） 以及JA反应基因，GydF4y2BaJiOsPR10公司GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bak） 以及GydF4y2BaOsbHLH35型GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2BaL)，在72h和120h显著抑制。此外，水杨酸合成途径基因GydF4y2BaOsEDS1 / OsPAD4GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bam、 n）水杨酸受体基因GydF4y2Baosnpr4.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba1GydF4y2Bao） 在72岁时显著上调 H棉子糖合成酶基因的表达水平GydF4y2BaOS01G0170000.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba2GydF4y2BaB)草酸氧化酶基因GydF4y2Ba奥索奥4.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba2GydF4y2Baa）和半乳糖醇合成酶基因GydF4y2Baosgols1.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba2GydF4y2BaC)在120 h时，发现在0 h时更低。蔗糖合酶基因GydF4y2Baosrsus1.GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba2GydF4y2Bad） 果糖合成酶基因GydF4y2BaOSFRK-2GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba2GydF4y2Bae）与0小时相比，在72小时和120小时的下调，虽然它们的水平明显高于感染野生型米饭。细胞壁相关的激酶GydF4y2BaOsCHI11GydF4y2Ba（图。SGydF4y2Ba1GydF4y2Baa）和GydF4y2Ba奥卡克85.GydF4y2Ba(图GydF4y2Ba1GydF4y2BaB)显著上调GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba结果表明，转基因水稻在72 h后，对mosdt1基因的表达量无显著影响GydF4y2BaOsPR10a型GydF4y2Ba（图。SGydF4y2Ba1GydF4y2BaC），GydF4y2BaOSPR4AGydF4y2Ba（图。SGydF4y2Ba1GydF4y2BaD） 哦，GydF4y2BaOSPR5.GydF4y2Ba（图。SGydF4y2Ba1GydF4y2BaE） 以及GydF4y2BaOSPR8.GydF4y2Ba（图。SGydF4y2Ba1GydF4y2BaF） 被下调了。上述基因表达的原始数据见补充文件GydF4y2Ba2GydF4y2Ba。GydF4y2Ba

中主要植物激素的测定GydF4y2Bamagnaporthe oryzae.GydF4y2Ba-infected mosdt1-转基因米饭GydF4y2Ba

多重反应监测(MRM)或选择性反应监测(SRM)是一个相当准确和灵敏的质谱平台，可以专门评价复杂混合物中的组分。应用该技术定量测定了大豆中JA和JA- ile的含量GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-在三个时间点（0 h、 72个 h、 和120 h） 是的。JA水平（图。GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba一种;补充文件GydF4y2Ba2GydF4y2Ba)和JA Ile（图。GydF4y2Ba3.GydF4y2Bab;补充文件GydF4y2Ba2GydF4y2Ba)GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba95234I-1b显著高于野生型。虽然JA和JA- ile的含量在120 h时达到最高水平，但JA- ile的含量远远低于JA水平(图1)。GydF4y2Ba3.GydF4y2BaA和B;补充文件GydF4y2Ba2GydF4y2Ba)．这表明JA是受感染的转基因水稻中茉莉酸的主要形式。GydF4y2Ba

外源化合物治疗后水稻诱导抗性分析GydF4y2Ba

在接种稻瘟病菌72 h后，将半乳糖醇、酪胺、l -谷氨酰胺、l -色氨酸、α-松油烯和多巴胺等6种代谢物按3种浓度处理水稻，发现与对照相比，稻瘟病症状明显减轻。GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba)．接种水稻稻瘟病菌72 h后，外源处理6种代谢物(稻瘟病褐斑开始出现)，与对照相比，病害指数显著下降(图1)。GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba；补充文件GydF4y2Ba2GydF4y2Ba)．这六种代谢物可作为外源应用的最佳标记防御代谢物，以改善稻瘟病褐斑型病变开始出现的稻瘟病患者。GydF4y2Ba

M. Oryzae.GydF4y2Ba-感染MoSDT1基因的水稻表现出多种防御代谢产物的积累和多种代谢途径的激活GydF4y2Ba

以往的研究表明，当病原菌侵染植物时，侵染诱导的不同代谢产物对增强植物抗病性和减轻病害症状起着至关重要的作用。我们先前的研究证实，水稻中MoSDT1的异源表达增加了分蘖数，但不影响其细胞核形态。最重要的是，它还导致了抗药性的显著增加GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在水稻中，主要表现为早期诱导大量胼胝质沉积、ROS积累、细胞死亡以及对感染MoSDT1转基因水稻防卫相关基因表达的调控。此外，参与防御反应的特异性初级代谢产物在转基因水稻中积累[GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba］．目的:进一步探讨抗逆性增强的生化机制GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba- 染色的MOSDT1-转基因水稻，分析代谢组科以更好地探索核心代谢物和临界代谢途径GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-感染MoSDT1转基因水稻。GydF4y2Ba

有机氧化合物、有机酸、酶和糖苷是受感染植物产生的第一类代谢物[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba］．本研究分别在0、72、120 h检测到蔗糖、棉子糖、半乳糖醇、d -甘露糖、麦芽糖等有机氧化合物的积累。d -甘露糖主要参与抗坏血酸的合成，抗坏血酸是一种抗氧化剂和细胞还原剂，提高抗氧化能力是植物抗性的特点之一[GydF4y2Ba20.GydF4y2Ba］．半乳糖醇还参与植物系统中的抗性[GydF4y2Ba21.GydF4y2Ba］．甘氨酸酸性上调GydF4y2Ba辣椒GydF4y2Ba-抗感染水稻，并参与光呼吸和植物防御反应调节[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba］．因此，这表明上述有机氧化合物是累积在感染的转基因水稻中的独特代谢物，其生化和结构防御状态具有高抗氧化能力的活化阶段。这些积累的代谢物属于氨基酸和碳水化合物代谢途径也被激活。因此，加强了受感染的转基因水稻的抗性。GydF4y2Ba

亚油酸和亚麻酸是脂质，发现在72小时积累。亚麻酸是茉莉酸的前体[GydF4y2Ba10.GydF4y2Ba]在植物防御反应中起着至关重要的作用。因此上调的亚烯酸是受感染的转基因水稻的独特代谢物。随后，进一步的实验验证了120小时的茉莉酸浓度的增加。始终如一地，亚油酸涉及72小时的亚油酸代谢。GydF4y2Ba

谷氨酰胺参与植物的应激反应[GydF4y2Ba22.GydF4y2Ba］．Kan等人发现谷氨酰胺可以用于信号分子的行为来改变植物的表达模式。转录因子的即时唤醒表明谷氨酰胺能够有效地强化其信号传导，参与多种信号通信途径，从而决定植物的生长及其对胁迫的反应。因此，谷氨酰胺是一种潜在的有效氨基酸，在植物营养和信号转导中起着至关重要的作用[GydF4y2Ba22.GydF4y2Ba］．l -色氨酸在72 h时积累，表明转基因水稻继续生长。草酸具有双重作用，在感染早期抑制植物防御反应，在感染后期诱导活性氧和细胞死亡[GydF4y2Ba23.GydF4y2Ba］．在我们的研究中，草酸盐的浓度在72小时下降，这有益，因为它提高了感染的转基因水稻的ROS间隙和抑制细胞死亡的能力。这些独特的代谢物中的大多数参与柠檬酸盐循环（TCA循环），从而表明该途径的激活。GydF4y2Ba

苯突累积在不同的时间点GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在转基因水稻中，水杨酸和邻氨基苯甲酸(维生素L1)在三个时间点积累。邻氨基苯甲酸(AA)是合成主要生长素吲哚-3-乙酸(IAA)的重要前体[GydF4y2Ba24.GydF4y2Ba]，这对于维持受感染的转基因水稻的生长至关重要。而水杨酸在防御反应中起着至关重要的作用[GydF4y2Ba25.GydF4y2Ba]，表明MoSDT1可能在平衡水稻生长和防御方面发挥作用。多巴胺具有抗衰老的作用，调节植物对营养物质的吸收和运输，最终影响植物的整体生长[GydF4y2Ba26.GydF4y2Ba］．当大麦感染时，诱导酪胺积聚有利于增加抵抗力的抗性GydF4y2BaBipolaris sorokinianaGydF4y2Ba[GydF4y2Ba27.GydF4y2Ba］．因此，转基因水稻中多巴胺和酪胺的积累有利于提高抗性。参与酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸代谢的代谢途径被激活。GydF4y2Ba

发现诸如Vitexin，核黄素，SINAPER醇，Diosmetin，肌醇，D-Biotin和Camptothecin以及α-突烯的未分化代谢物，并且在不同的时间点以不同程度累积。Vitexin和Apigenin都具有抗病毒，抗氧化剂和植物中的抗癌作用[GydF4y2Ba28.GydF4y2Ba］．L-酪氨酸，芳族氨基酸，是草地植物中木质素的前体[GydF4y2Ba29.GydF4y2Ba］．d -生物素在抗GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba感染及促进水稻生长[GydF4y2Ba30.GydF4y2Ba］．同时，D-biotin也能抑制ROS的积累和损伤模拟物的出现[GydF4y2Ba30.GydF4y2Ba］．Sinapyl醇是木质素单体合成的产品[GydF4y2Ba11.GydF4y2Ba］．Diosmetin，一种具有抗氧化活性的黄酮化合物，保护植物组织免受氧化[GydF4y2Ba25.GydF4y2Ba]. 肌醇在非生物胁迫耐受中也起着重要作用[GydF4y2Ba31.GydF4y2Ba］．这些结果表明，这些代谢物在维持生长方面发挥着重要作用GydF4y2Bamagnaporthe oryzae.GydF4y2Ba-感染转基因水稻，保持ROS积累和清除的动态平衡，启动结构防御反应，抑制斑点病的扩展，增强转基因水稻的抗性。GydF4y2Ba

总的来说，在感染MoSDT1转基因水稻的过程中GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在三次点，有机氧化合物，脂质和脂质状分子，苯骨，有机酸和衍生物，以及许多未分类的原发性防御性代谢物积累。与这些代谢物相关的代谢途径归因于碳水化合物和氨基酸代谢途径，这在应力反应中起关键作用[GydF4y2Ba19.GydF4y2Ba］．因此，这些激活的途径参与了米防御反应。这项研究发现，在72小时，防守代谢物的积累达到了峰值，表明72小时是最具活性的防御反应的时间，这也是棕色斑点病变开始出现的时间点[GydF4y2Ba32.GydF4y2Ba］．此时累积防御性代谢物数量的增加有利于加强MOSDT1-转基因水稻的防御反应，限制斑点病变的扩散并增加水稻的抗性。GydF4y2Ba

本研究所鉴定的累积代谢物，如薯蓣皂甙、D-生物素、酪胺、半乳糖醇、α-蒎烯、L-色氨酸、亚麻酸、蔗糖、棉子糖、果糖和L-谷氨酰胺，可作为增强水稻抗性的核心防御代谢物。因此，主要富含碳水化合物和氨基酸的代谢途径是防御反应的关键。GydF4y2Ba

多重防御性代谢物反应基因和植物激素之间的串扰GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-infected mosdt1-转基因米饭GydF4y2Ba

亚麻酸和亚油酸是茉莉酸合成的前体[GydF4y2Ba10.GydF4y2Ba］．水杨酸和茉莉酸是重要的植物激素，在水稻的防御反应和稳定生长中起着至关重要的作用[GydF4y2Ba33.GydF4y2Ba］．Sun等人研究了水稻对SA反应的磷酸化蛋白质组学变化，认为SA介导的磷酸化调控可能导致两个水稻品种的抗性不同[GydF4y2Ba34.GydF4y2Ba］．GydF4y2BaOsVQ13型GydF4y2Ba通过激活水稻OsMPK6-OsWRKY45信号通路正向调控JA信号[GydF4y2Ba35.GydF4y2Ba］．JA通过抑制Brassinosteroid（BR）途径来降低RBSDV感染的敏感性[GydF4y2Ba36.GydF4y2Ba]. 然而，JA/SA在水稻防御反应中的作用尚不清楚。GydF4y2Ba

在本研究中，这两种代谢物和水杨酸被确定积累在GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba- 在72小时的-MOSDT1-转基因米。同时，受感染的转基因水稻的Ja，Ja-Ile和水杨酸的含量高于感染的野生型水稻。GydF4y2Ba

在本研究中，JA信号通路基因(GydF4y2BaOsCOI1b公司GydF4y2Ba那GydF4y2BaOsJAZ1GydF4y2Ba那GydF4y2Ba奥斯贾兹9号，GydF4y2Ba和GydF4y2BaOsMYC2)GydF4y2Ba、JA早期反应基因(GydF4y2BaJiOsPR10公司GydF4y2Ba和GydF4y2BaOsbHLH35型GydF4y2Ba)和防御相关基因(GydF4y2BaOSPR4AGydF4y2Ba和GydF4y2BaOsPR10a)GydF4y2Ba抑制在72小时和120小时。进一步分析JA合成途径相关基因显示GydF4y2Ba奥斯洛克斯1/ 3.GydF4y2Ba那GydF4y2Baoshpl3.GydF4y2Ba那GydF4y2BaOsOPR1GydF4y2Ba那GydF4y2BaOsOPR7GydF4y2Ba， 和GydF4y2BaOsJMT1型GydF4y2Ba在72岁时被上调 H此外，GydF4y2BaOsLOX3GydF4y2Ba在72 h时积累了大量的亚麻酸，随后在120 h时JA量达到峰值。由此可见，GydF4y2BaOsLOX3GydF4y2Ba主要参与亚麻酸向13-过氧化氢的转化。GydF4y2BaOsLOX1GydF4y2Ba和GydF4y2BaOsLOX3GydF4y2Ba在遗传结构中类似，两者都参与病原体防御反应[GydF4y2Ba37.GydF4y2Ba],GydF4y2Baoshpl3.GydF4y2BaMediates SA和JA增加并增强米防御反应[GydF4y2Ba36.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba38.GydF4y2Ba］．在这项研究中发现了JA和SA水平增加，表明这一点GydF4y2Baoshpl3.GydF4y2Ba调节JA和SA含量以应对病原体感染。除了在JA合成中的作用外，GydF4y2BaOsJMT1型GydF4y2Ba还主要参与应对病原体感染，在此期间GydF4y2BaOsOPR7GydF4y2Ba参与植物中的JA生物合成。然而，GydF4y2BaOsOPR1GydF4y2Ba在大米自卫反应中发挥作用[GydF4y2Ba39.GydF4y2Ba]，表明茉莉酸合成途径被激活，该途径中的基因既参与茉莉酸合成，又参与防御反应。由此推测，MoSDT1可能通过调控茉莉酸合成途径相关基因，在茉莉酸合成和防御反应中发挥作用。GydF4y2Ba

一方面，对GydF4y2BaOsEDS1 / OsPAD4GydF4y2Ba促进SA生物合成，而另一方面，它保持SA相关的抗性反应，加强植物的内部免疫系统[GydF4y2Ba40GydF4y2Ba］．据报道，淘汰了GydF4y2BarrsRLK公司GydF4y2Ba基因可以诱导显着的上调GydF4y2BaOsPR1aGydF4y2Ba那GydF4y2BaOsPR1bGydF4y2Ba那GydF4y2BaOsLOXGydF4y2Ba和GydF4y2Barbbti4.GydF4y2Ba[GydF4y2Ba41.GydF4y2Ba］．因此，表明当传递水稻被感染时，可以增强内部免疫系统的活化。GydF4y2Ba

表达水平GydF4y2Ba奥索奥4.GydF4y2Ba基因表达显著上调GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba- 在72小时的-MOSDT1-转基因米。同时，感染转基因水稻中草酸盐的浓度降低，表明GydF4y2Ba奥索奥4.GydF4y2Ba在72小时下发挥清除草酸盐的作用，避免了转基因水稻感染后期活性氧物种的积累和对细胞死亡的抑制。奖酶合酶基因的表达水平GydF4y2BaOS01G0170000.GydF4y2Ba和半乳糖醇合成酶基因GydF4y2Baosgols1.GydF4y2Ba在GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-感染mosdt1基因的水稻高于野生型。水杨酸(SA)和一氧化氮(NO)也在保护植物免受氧化损伤中发挥作用[GydF4y2Ba42.GydF4y2Ba]; 因此，感染转基因水稻的氧化损伤低于野生型水稻。因此，GydF4y2Ba奥索奥4.GydF4y2Ba那GydF4y2BaOs01g0170000,GydF4y2Ba和GydF4y2Baosgols1.GydF4y2Ba发挥保护作用GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-感染MoSDT1的转基因水稻不受活性氧的侵染，并在侵染后期抑制细胞的剧烈死亡。GydF4y2Ba

几丁质酶和细胞壁相关激酶在植物防御和抵抗病原真菌侵染中起着重要作用[GydF4y2Ba43.GydF4y2Ba］．纤维素合酶复合物由与植物碳状况相关的代谢信号调节[GydF4y2Ba44.GydF4y2Ba］．大多数进入细胞质的果糖在果糖酶（FRK）磷酸化后，成为木质血管，纤维和整体血管系统发育中的细胞壁合成功能的组分[GydF4y2Ba45.GydF4y2Ba］．在本研究中，细胞壁相关激酶基因的表达水平GydF4y2BaOsCHI11GydF4y2Ba和GydF4y2Ba奥卡克85.GydF4y2Ba，蔗糖合酶基因GydF4y2Baosrsus1.GydF4y2Ba果糖合成酶基因GydF4y2BaOsFRK–2个GydF4y2Ba与野生型米饭相比，在MOSDT1-转基因水稻中显着较高。因此，表明这些上调基因参与细胞壁重塑或结构，以增强MOSDT1-转基因水稻的物理屏障。GydF4y2Ba

总结，萨，Ja，奖酶糖，果糖和蔗糖积累在GydF4y2BaM. oryzae-GydF4y2Ba感染MoSDT1-transgenic大米。同时，JA合成、SA合成/受体基因、棉子糖、果糖、蔗糖合成酶基因和细胞壁相关激酶基因均上调。相反，与JA信号基因相关的基因则受到抑制。这些结果表明，茉莉酸和水杨酸在mosdt1转基因水稻的防御反应中起协同作用。ROS清除相关基因(GydF4y2Ba氧化钾）GydF4y2Ba和棉糖合成基因（GydF4y2BaOS01G0170000.GydF4y2Ba那GydF4y2BaOsgols1）GydF4y2Ba起到保护活性氧损伤的作用。此外，果糖/蔗糖合酶基因和细胞壁相关激酶基因在细胞壁重塑中是必不可少的。GydF4y2Ba

改进的耐GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba用防御性代谢物进行外源性治疗GydF4y2Ba

研究表明，生物素，半乳糖醇，柠檬酸盐，酪胺，奖石，L-谷氨酰胺，L-色氨酸，多巴胺，半乳糖醇，萜烯，L-色氨酸和其他代谢物作为植物防御系统中的防御性信号[GydF4y2Ba22.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba46.GydF4y2Ba］．米饭感染了GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba在叶片上形成棕色斑点病变在72 h进入尸体营养阶段的时间点[GydF4y2Ba32.GydF4y2Ba］．这是在感染的转基因水稻中检测到代谢物积累时的时间点，并且这些代谢物中的大部分与病原体抗性有关。此外，还表明，外源性施用代谢物（如GABA，多巴胺，脯氨酸，酪胺）可以增加植物阻力[GydF4y2Ba26.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba47.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba48.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba49.GydF4y2Ba］．从mosdt1转基因水稻中积累的代谢物GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba选择6种代谢物（半乳糖醇、酪胺、L-谷氨酰胺、L-色氨酸、蒎烯和多巴胺）进行处理GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba-两种外源性感染水稻。6种代谢物中，72 h处理显著提高了水稻的抗性，低浓度处理对水稻抗性也有显著改善作用。因此，当稻瘟病褐斑病开始形成(72 h)时，作为防御武器的低浓度代谢物的控制反应最为明显;然而，所涉及的潜在机制需要进一步的研究。GydF4y2Ba

为了总结，在累积在病原体感染植物的不同阶段的防御性代谢物中，选择六种防御性代谢物在感染的特定时间点外，在感染的特定时间点外产生植物以改善植物抗性。因此，这使防御性代谢物的外源性应用成为未来应用的环境控制策略。GydF4y2Ba

本研究提供了对新代谢改变的洞察GydF4y2BaMOSDT1GydF4y2Ba-转基因水稻感染GydF4y2Ba稻瘟病GydF4y2Ba。结果表明，更多的主要防御性代谢物累积在GydF4y2BaMOSDT1GydF4y2Ba在侵染后期，部分防御代谢物能够外源性缓解侵染水稻的稻瘟病症状，可作为侵染后期的最佳防御标记物GydF4y2Ba稻瘟病GydF4y2Ba感染。Sa-JA调节与防御相关基因表达的协同相互作用，以增强水稻防御反应。我们的结果披露了代谢机制GydF4y2BaMOSDT1GydF4y2Ba- 在捍卫卫生间的转变米饭GydF4y2Ba稻瘟病GydF4y2Ba为加强水稻的广谱抗性和稻瘟病防治提供了有价值的依据。GydF4y2Ba

水稻生长和水稻爆炸应变培养GydF4y2Ba

MOSDT1-转基因线＃10，WT品种（GydF4y2BaO。莎蒂瓦GydF4y2Ba单一共享平台。GydF4y2Bajaponica.GydF4y2Ba简历。Ilmibyeo）是韩国国产水稻品种，代表了韩国市场上的白米，是由Milyang`96//Milyang`95/Seomjinbyeo三元杂交而成[GydF4y2Ba50GydF4y2Ba]如前所述，在实验室中保持了稻瘟病菌株95234I-1b[GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba］．栽培水稻幼苗的方法也基于Wang等人的报告。[GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba]. 稻瘟病菌株95234I-1b是本实验室分离到的一株稻瘟病菌株，其毒力强，能侵染水稻品种伊利米，引起严重的稻瘟病症状。然而，过度表达GydF4y2BaMOSDT1GydF4y2Ba在ilimi中显著提高了水稻对该品系的抗性[GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba］．为了进一步研究MOSDT1-转基因水稻和95234i-1b之间的相互作用的代谢机制，我们使用95234i-1b感染MOSDT1-转基因水稻作为研究材料。GydF4y2Ba

＃10和WT的水稻种子在75％醇中灭菌1分钟，在无菌水中洗涤三次，然后在1.5％次氯酸盐溶液中灭菌5分钟，最后在无菌水中洗涤三次。然后将种子分别在5％潮霉素水溶液和无菌水中发芽，在28℃下。种子在塑料桶和板中播种，每次处理都重复三次。塑料桶中的幼苗根据温室的常规管理培养14天。GydF4y2Ba

在28℃下在PSA培养基（200g土豆，10g糖，15g琼脂粉，1L无菌水中，1L无菌水）中培养95,234 I-1B的稻瘟病菌株。在菌丝体在培养皿上生长后，表面菌丝菌丝体刮掉，并使用灭菌水洗涤孢子以制备孢子悬浮液。将孢子悬浮液的浓度调节至1×10GydF4y2Ba^5.GydF4y2Ba/mL用于喷雾接种。将孢子悬浮液接种于14日龄水稻叶片上，接种后的叶片于28日龄孵育 24°C 然后搬到温室里生长。样本采集时间为0 h、 72个 h、 和120 接种h后，用6个生物复制品进行uhpc-Q-TOF-MS分析。每一次复制对6株植物的叶片进行取样。用三个生物重复进行qRT-PCR分析，每个重复取三株植物的叶片。GydF4y2Ba

UHPLC-Q-TOF MS分析GydF4y2Ba

结合AB-Triple-TOF 5600/6600质谱仪（AB-Sciex，美国）和Q-TOF-MS/MS进行分析。水稻样品在液氮中磨碎，加入1 mL甲醇：乙腈：水溶液（2:2:1，v:v:v），涡流60分钟 低温超声2次（30次） 每次最小）。然后把它放在− 20 °C，适用于1 h、 以14000 rcf离心，4 °C持续20分钟 最小值，冷冻干燥并保存在− 80 摄氏度。样品用安捷伦1290无限长液相色谱柱（美国安捷伦）分离。该列设置为25 °C，流速设置为0.3 mL/min，流动相组成为A：水+ 25 醋酸铵+ 25 mM氨水，B:乙氧基。梯度洗脱程序如下：0-5 最小值，95%B；0.5–7 min，B由95%线性变化到65%；7–8 min，B从65线性变化到40%，B在8-9期间保持在40% 最小值。B从40%到95%的线性变化为9–9.1 在9-12个月内，最低体重保持在95% 将样品置于4 °C全过程自动取样器。质谱检测采用电喷雾（ESI）正负离子模式。样品用超高压液相色谱分离，Agilent6550质谱仪分析。ESI源条件为：气体Tem:250 °C，干燥气体：16 L/min，雾化器：20 psig，鞘气温度：400 °C，护套气体流量：12 l/min，Vcap:3000V，喷嘴电压0V，碎片175V，质量范围50-1200，采集速率4 赫兹，循环时间：250 ms.对样品进行检测后，用AB-Triple-TOF-6600质谱仪对代谢物进行鉴定，并采集一、二级光谱。离子源Gas1（Gas1）：40，离子源Gas2（Gas2）：80，气幕（CUR）30，源温度650 °C，离子隔离浮动电压（ISVF）±5000 V（正负两种模式），通过信息相关采集（IDA）和高灵敏度模式获得的二次质谱，去聚类电位（DP）：±60 V（正负两种模式），碰撞能量：35±eV，IDA：排除4以内的同位素 Da，每周期监测的候选离子：10。数据采集按质量范围50-300、290-600、590-900、890-1200进行分段，以扩大二级图谱的采集率。每种方法产生的数据在每个部分收集四次。原始数据被转换成。用Proteo-Wizard实现MzXML格式，然后用XCMS程序进行峰对齐、保留时间校正和峰面积提取。精确的质量数匹配(< 25 采用ppm）和二级图匹配的方法对数据库进行检索，进行代谢物结构鉴定。数据经pareto标度预处理后，进行多维统计分析，包括无监督主成分分析（PCA）、有监督偏最小二乘判别分析（PLS-DA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）。一维统计分析包括t检验和变量多重分析。GydF4y2Ba

水稻防御相关基因的表达分析GydF4y2Ba

RT-qPCR采用Wang等人在0、72、120 h接种水稻稻瘟病菌的mosdt1转基因株系和WT进行[GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba］．采用Bio-Rad CFX96 TM实时系统(Bio-Rad, USA)进行cDNA逆转录。操作按照GoScript TM逆转录系统A5001试剂盒(TransGen Biotechnology Co.， Ltd, Beijing)进行。qRT-PCR荧光染料SYBR Premix Ex Taq II按照上述说明制备反应体系，总体积为20 μL。引物5用于设计防御相关基因的引物(引物序列见补充表)GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba)．BIO-RAD CFX96 TM实时系统（BIO-RAD，USA）用于产品扩增和荧光信号检测。GydF4y2Ba

植物内源激素测定法GydF4y2Ba

植物内源激素测定根据Benton等人的方法进行。[GydF4y2Ba51GydF4y2Ba］．使用液态氮气研磨米叶（1g），将80mg在2ml离心管中取出，加入50μl内标溶液以及1ml乙腈水溶液（1％Fa）。它被摇动并混合井2分钟，在黑暗中保持在4℃下12小时，以14000×g离心10分钟，取出800μl上清液并用液氮干燥。将其重构100μl乙腈 - 水（1：1，v / v），以14000×g离心10分钟，并使用上清液进行分析。通过Agilent 1290 Infinity LC超高效液相色谱平台（流动相：液体A为0.05％FA溶液，液体B为0.05％Fa乙腈）分离样品。将样品置于4°C的自动取样器中，以400μL/ min的流速设定在45℃下，并且负载体积为2μL。相应的液相梯度如下：0-10分钟，B液体线性地改变2至98％;10-11.1分钟，B液体从98〜2％线性变化;11.1-13分钟，B液体保持在2％。将QC样品置于样品顺序中的一定数量的实验样品以检测和评估系统的稳定性和可重复性。 Mass spectrometry analysis was performed in positive/negative ion mode by using a 5500 QTRAP mass spectrometer (AB SCIEX). The 5500 QTRAP ESI conditions were as follows: source temperature 500 °C, ion Source Gas1 (Gas1): 45, Ion Source Gas2 (Gas2): 45, Curtain gas (CUR): 30, ionSapary Voltage Floating (ISVF)–4500 V; MRM mode was used to detect the pair of ions. The peak area and retention time were calculated using Multiquant software. The amount of phytohormone measured in the sample was calculated based on the standard curve.

对水稻抗性外源化合物处理的评价GydF4y2Ba

首先，用孢子接种米叶GydF4y2BaM. Oryzae.GydF4y2Ba菌株95234I–1b，72天后喷施外源化合物 三种浓度下的h（补充表GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba)，并制备了六种化合物的浓度[GydF4y2Ba21.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba24.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba26.GydF4y2Ba］．病害指数=∑(各等级叶片数×各等级代表值)/(综述总叶片数×最高等级代表值)× 100 [GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba］．所有实验都在实验室/温室下进行。条件控制在28°C/26°C(昼/夜)，光照16小时，黑暗8小时，相对湿度为50%。实验采用生物重复和技术重复各3次。GydF4y2Ba

本研究中产生或分析的所有数据均包含在本文[及其补充信息文件]中。本研究中使用和/或分析的数据集可在合理要求下从通讯作者处获得。GydF4y2Ba

MoSDT1:GydF4y2Ba

magnaporthe oryzae.GydF4y2Ba系统防御触发器1GydF4y2Ba

UHPLC / Q-TOF-MS：GydF4y2Ba

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法GydF4y2Ba

山:GydF4y2Ba

水杨酸GydF4y2Ba

JA：GydF4y2Ba

茉莉酸GydF4y2Ba

PAMP / MAMP：GydF4y2Ba

病原体相关的分子模式/微生物相关分子模式GydF4y2Ba

PTI:GydF4y2Ba

PAMP时/ MAMP-triggered免疫力GydF4y2Ba

指数:GydF4y2Ba

Effector-triggered免疫力GydF4y2Ba

ABC转运蛋白:GydF4y2Ba

腺苷结合盒转运体GydF4y2Ba

qRT PCR：GydF4y2Ba

定量实时聚合酶链反应GydF4y2Ba

KEGG:GydF4y2Ba

京都基因和基因组百科全书GydF4y2Ba

奥斯洛克斯1/ 3：GydF4y2Ba

大米lipoxygenase1/3GydF4y2Ba

OsOPR1/7:GydF4y2Ba

大米oxophytodienoate reductase1/7GydF4y2Ba

osjmt1：GydF4y2Ba

米茉莉酸盐o-甲基转移酶GydF4y2Ba

oshpl3：GydF4y2Ba

水稻氢过氧化物酶3.GydF4y2Ba

OsCOI1b：GydF4y2Ba

米冠状素不敏感1BGydF4y2Ba

OsJAZ1/9:GydF4y2Ba

水稻茉莉酸zima结构域蛋白1/9GydF4y2Ba

OsEDS1 / OsPAD4:GydF4y2Ba

水稻增强疾病易感性1 /水稻植物肺素缺乏4GydF4y2Ba

JiosP1：GydF4y2Ba

茉莉酸诱导致病相关10类蛋白GydF4y2Ba

OsbHLH35:GydF4y2Ba

大米基本螺旋环螺旋35GydF4y2Ba

OsNPR4:GydF4y2Ba

水稻受体基因4GydF4y2Ba

OsOXO4:GydF4y2Ba

水稻草酸氧化酶4GydF4y2Ba

OsGolS1:GydF4y2Ba

水稻半乳糖醇合成酶1GydF4y2Ba

OsFRK-2:GydF4y2Ba

大米果糖合成酶−2GydF4y2Ba

osrsus1：GydF4y2Ba

水稻蔗糖合酶1GydF4y2Ba

OsCHI11:GydF4y2Ba

米卡丁酶11.GydF4y2Ba

OSPR8：GydF4y2Ba

水稻致病性相关的基因8GydF4y2Ba

OSPR4A：GydF4y2Ba

水稻致病相关基因4aGydF4y2Ba

OsPR10a:GydF4y2Ba

水稻致病性相关基因10AGydF4y2Ba

OSPR5：GydF4y2Ba

水稻致病性相关的基因5GydF4y2Ba

OsWAK85:GydF4y2Ba

水稻壁相关激酶85GydF4y2Ba

我们感谢李东荪博士提供的Ilmibyeo水稻材料，以及实验室成员和审稿人在本研究中的帮助。GydF4y2Ba

基金资助:国家自然科学基金项目(No.31860483, No.31400073)，云南大学科技创新团队项目(IRTSTYN)。GydF4y2Ba

作者指出GydF4y2Ba

1. 段桂华、李春琴和刘艳芳对这项工作的贡献不相上下。GydF4y2Ba

隶属关系GydF4y2Ba

1. 2 .云南农业大学云南省生物资源保护与利用国家重点实验室，云南昆明650201GydF4y2Ba

   桂花段，春琴李，延方刘，小青马，琼罗阳GydF4y2Ba

2. 2 .云南农业大学农业生物多样性与有害生物防治教育部重点实验室，云南昆明650201GydF4y2Ba

   桂花段，春琴李，延方刘，小青马，琼罗阳GydF4y2Ba

3. 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所，昆明，650205GydF4y2Ba

   刘芳刘GydF4y2Ba

贡献GydF4y2Ba

Gd，Cl和Ly进行了分子生物学研究，参与了QRT-PCR分析和统计分析。CL和XM进行了接种实验和JA含量测定。JY构思了这项研究，设计了研究并起草了手稿。QL有助于起草稿件。所有作者阅读并认可的终稿。GydF4y2Ba

通讯作者GydF4y2Ba

通信GydF4y2Ba景阳GydF4y2Ba。GydF4y2Ba

道德认可和参与同意GydF4y2Ba

不适用。GydF4y2Ba

出版许可GydF4y2Ba

不适用。GydF4y2Ba

相互竞争的利益GydF4y2Ba

作者声明没有利益冲突。GydF4y2Ba

出版商的注意事项GydF4y2Ba

Springer Nature在发表地图和机构附属机构中的司法管辖权索赔方面仍然是中立的。GydF4y2Ba

开放访问GydF4y2Ba本文根据创意公约归因于4.0国际许可证，这允许在任何中或格式中使用，共享，适应，分发和复制，只要您向原始作者和来源提供适当的信贷，提供了一个链接到Creative Commons许可证，并指出是否进行了更改。除非信用额度另有说明，否则本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的创造性公共许可证中，除非信用额度另有说明。如果物品不包含在物品的创造性的公共许可证中，法定规定不允许您的预期用途或超过允许使用，您需要直接从版权所有者获得许可。要查看本许可证的副本，请访问GydF4y2Bahttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/GydF4y2Ba。Creative Commons公共领域奉献豁免（GydF4y2Bahttp://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/GydF4y2Ba)适用于本条提供的数据，除非信用额度中另有规定。GydF4y2Ba

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