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在Cyanbacterium中修复照相系统II需要FTSH蛋白酶SyneChocystis.6803损坏的UV-B辐射
BMC植物生物学体积5., 文章编号:S8(2005年)
材料和方法
SyneChocystis.sp。PCC 6803细胞在旋转振荡器中在30℃下在5%CO的旋转振荡器中在BG-11生长培养基中繁殖2- 中间的气氛。通过中断,构建了MFTSH突变体SLR0228.如参考文献所述的含氯霉素抗性盒的基因。[5.]。在开放的玻璃容器中进行UV-B照射,其中细胞悬浮液为6.5mg CHL mL-1形成一层10毫米。vilbert-lourmat VL-215M灯用作UV-B光源,在312nm处具有最大发射,与0.1mm醋酸纤维素过滤器(Clarfoil,Comparaluds,UK)组合,以筛选任何UV-C贡献。UV-B强度为4.8毫米-2(≈13mem-2S.-1)在细胞悬浮液的表面。通过定量RT PCR检测FTSH同源物基因的转录物水平的UV诱导的变化。使用Hansatech DW2 O测量光饱和稳态氧气进化速率2电极在1000 mem的光强度下-2S.-1在0.5mm 2,5-二甲基的存在下P.- 苯并喹诺酮作为电子受体。
结果
蓝杆菌SyneChocystis.6803有四种膜结合的ATP依赖性FTSH蛋白酶编码SLR0228.那SLR1390.那SLR1604.和SLL1463.基因[6.]。通过定量RT PCR检查了UV-B辐射对这些基因的相对转录水平的影响。如图中的数据所示1。在90分钟的UV-B暴露后,所有四种基因诱导超过2倍,具有最显着的效果SLR0228.和SLR1604.转录物。
在寻找FTSH蛋白酶的作用,我们研究了来自其SLR0228.基因已删除。与WT相比,MFTSH菌株在UV-B暴露下显示出加速氧气蒸馏的损失,并且在可见光下几乎完全缺乏恢复(图。2。)。在蛋白质合成抑制剂LiNcomcin存在下,MFTSH菌株中的氧气进化的损失几乎是相同的动力学(图。2。)。
结论
我们的数据表明,FTSH蛋白酶是UV损坏的PSII中心的有效修复所必需的SyneChocystis.6803细胞。考虑到恢复PSII活动需要德诺维D1反应中心蛋白的合成[3.[我们得出结论,在MFTSH菌株中,D1蛋白的降解和合成被阻断。
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致谢
匈牙利授予机构OTKA(T034321)的授予支持这项工作得到了支持。
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Cheregi,O.,Sicora,C.,Kos,P.B.等等。在Cyanbacterium中修复照相系统II需要FTSH蛋白酶SyneChocystis.6803损坏的UV-B辐射。BMC植物BIOL.5,S8(2005)。https://doi.org/10.1186/1471-2229-5-S1-S8
关键词
- 氧气进化
- Lincomcin.
- psii活动
- 反应中心复合体
- 反应中心蛋白质