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用齐氧化氮和过氧化氢处理烟草逐次细胞的结构分析

背景

一氧化氮(NO)是植物中的重要信号分子。它会影响许多生理过程[1]。在生物应激植物期间同时产生NO和反应性氧物质(ROS)。NO和ROS的稳态浓度的比例对于诱导或预防细胞死亡是决定性的决定性[2]。使用人工供体系统也证明了这种效果以产生NO和ROS(例如,H.2O.2)[23.]。我们的作品的目的是验证硝普钠(SNP;没有供体)和葡萄糖氧化酶的特定作用(GGO; H.2O.2捐赠者)在细胞死亡过程中。

材料和方法

烟草(BY-2)的细胞悬浮液将0.5mM SNP,0.5mM钾铁氰化物(PFC)作为SNP的类似物处理,其不能分别不能释放NO和0.5mM葡萄糖葡萄糖氧化酶,而且GGO与SNP或PFC的组合。在12小时实验期间,在2小时间隔收集细胞样品。通过用荧光素Diaceate(FDA)和碘化丙啶双重染色检测活力。通过MTT测定法测量氧化还原酶活性。通过CTAB方法分离DNA,并在标准琼脂糖凝胶上评价其降解。通过荧光(FDA染色),明场和相位对比显微镜评估细胞的形态。通过中性红(NR)染色来检测酸性隔室。为了观察核形态,通过Hoechst 22385固定并染色细胞。

结果

只有在同时效应SNP和GGO细胞死亡的情况下,似乎只出现(所有细胞都在12中死亡TH.H实验)。相反,MTT测定显示,所有五种处理的变体中,氧化还原酶活性降低。在诱导细胞死亡核期间逐渐损失圆形形状,染色质转向粒状状态,但实验结束时只发生轻微的DNA降解。在细胞内,减少真空沥青的数量,并且在治疗变体中存在畸形细胞中的小囊泡。NR染色也显示出一些酸性隔室。

结论

SNP和GGO诱导细胞死亡治疗烟草细胞。我们核实在这种情况下,SNP在这种情况下均无特定效果,尽管铁氰化物部分影响了实验系统。细胞的形态发生变化,核显示细胞死亡的特征。拟议DNA只是略微降解。

参考

  1. 1。

    leesem yy:植物中的一氧化氮发生,功能和使用。Dortrecht:Kluwer学术出版物;2000年。

    谷歌学术

  2. 2。

    Delledonne M,Murgia I,Ederle D,Sbicego PF,Biondani A,Polverari A,Lamb C:反应性氧中间体调节植物过敏性疾病抗性反应中的一氧化氮信号。植物理性生物化学。2002,40:605-610。10.1016 / s0981-9428(02)01397-9。

    文章CAS.谷歌学术

  3. 3.

    De Pinto MC,Tommasi F,DE GARA L:抗氧化系统的变化作为信号传导途径的一部分,其负责由一氧化氮和反应性氧物种在烟草亮黄色2细胞中激活的编程细胞死亡。植物理性。2002,130:698-708。10.1104 / pp.005629。

    pmed中央文章CAS.PubMed.谷歌学术

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致谢

本工作由FRVS No.180 / 2004,GACR No.525 / 04 / P132,Iga Mzlu No.3 / 2004和国家研究中心LN00a081资助。

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关于这篇文章

引用这篇文章

Víteček,J.,Kizek,R.&Havel,L.用协同合成一氧化氮和过氧化氢处理的烟草BY-2细胞的结构分析。BMC植物BIOL.5,S34(2005)。https://doi.org/10.1186/1471-2229-5-S1-S34

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关键词

  • 一氧化氮
  • 一氧化氮
  • 十字锰
  • 硝普钠钠
  • 铁氰化钾